东北红豆杉细胞培养过程中细胞分化和次生代谢间关系的系统分析.pdfVIP

摘要 植物细胞分化和次生代谢之间的关系是植物细胞培养过程中的关键科学问 题。本文通过外加不同浓度组合的生长素NAA和细胞分裂素6．BA定向诱导东 北红豆杉细胞产生不同的分化程度，从而建立细胞分化模型。运用高通量的蛋白 组学、代谢组学和磷脂组学分析策略结合生物信息学手段，试图对东北红豆杉细 胞培养过程中细胞分化、胁迫响应和次生代谢之间关系的分子机理进行系统地探 讨。 通过表型学观察和生理检测发现不同浓度组合NAA和6．BA作用20天后， 仅有6．BA作用的东北红豆杉细胞细胞胞内紫杉醇大量积累，同时细胞壁内出现 大量木质素累积；在NAA：6．BA=1．0：1．0和2．O：2．O作用时，胞内紫杉醇积累也明 显提高，且细胞壁出现非常明显的脉管分化。 北红豆杉细胞的蛋白表达谱。通过质谱鉴定了与细胞分化表型和紫杉醇积累密切 相关的11个蛋白点，发现他们主要是与细胞分化相关的蛋白、与类异戊二烯代 谢途径相关蛋白和与胁迫响应相关的蛋白。其中CDP．FtsH和IPT的表达和紫杉 醇积累呈正相关。 基于GC．TOF／MS获得了不同浓度组合NAA和6．BA作用下的小分子量代谢 物图库，鉴定了80种小分子代谢物。结合PCA分析对45个样本进行了聚类， 聚类结果与表型学观察结果和紫杉醇积累规