验证方案异烟肼有关物质.docVIP

验证原因： 验证类型： 新项目验证 再验证 其它 √ 预验证 回顾性验证 转移验证 √ 方法描述： 本分析方法为中国药典2010年版方法。为确保其检测结果准确，对该分析方法的专属性、精密度（系统精密度、方法精密度）、检测限、定量限、耐用性进行评价。 验证时间： 2010年07月05日～2010年07月08日 验证项目组成员及职责： 部门 成员 职责 QC 仪器设备的确认 QC 分析方法编写 QC 分析测试 QC主管 数据评估 质量部经理 审核批准 验证内容:- 序列号 确认测试项目 可接受标准 01 1 01. 2 仪器设备的确认 高效液相色谱仪的确认 天平的确认 符合仪器设备的确认要求 符合仪器设备的确认要求 02 具体测试内容 02.1 系统精密度 对异烟肼供试品溶液进行6针分析，分别计算其主峰峰面积和保留时间的相对标准偏差。 异烟肼峰面积RSD≤2.0%,保留时间RSD≤2.0%。异烟肼理论塔板数大于4000。 02.2 方法精密度 平行配制6份同一批供试品溶液，每份溶液进样1针，计算每份样品有关物质的相对标准偏差。 RSD≤5.0%。 02.3 检测限 配置供试品溶液，逐步稀释至一定浓度并进样，重复进该溶液1针，确认信噪比为2~3。 S/N=2~3 02.4 定量限 配置供试品溶液，逐步稀释至一定浓度并进样，重复进该溶液1针，信噪比为9~11为定量限。 S/N=9~11 02.5 专属性 进样流动相（空白）溶液，水(溶剂),水合肼溶液，异烟酸溶液，异烟肼溶液，异烟酸，异烟肼和水合肼混合溶液，记录保留时间。 酸破坏试验 碱破坏试验 氧化破坏试验 强光照射试验 高温破坏试验 空白溶液峰、起始物料异烟酸溶液的峰对异烟肼没有干扰；混合溶液中各峰的分离度≥1.5。酸碱破坏及氧化、强光照射试验、高温破坏出新的降解产物与主峰的分离度均≥1.5 02.6 耐用性 配制异烟酸和异烟肼混合溶液，按下列条件改变方法，稳定后按顺序进样，计算异烟肼的理论塔板数，混合溶液中异烟酸和异烟肼的相对保留时间RRT。 改变流速为0.9ml/min和1.1ml/min。 改变柱温为23℃和27℃。 改变流动相缓冲液与甲醇配比为83:17和87:13。 同一填料不同色谱柱。 理论塔板数大于4000，拖尾因子在0.9～1.4之间,分离度R＞1.5，相对保留时间RRT偏差绝对值不大于20％。 03 03.1 03.2 03.3 03.4 程序及文件 液相色谱仪校正规程 液相色谱仪操作规程 分析天平操作规程 分析天平校正规程 符合要求 符合要求 符合要求 符合要求 验证前准备： 人员培训： 姓名 培训时间 培训内容 仪器设备、标准品和试剂： 仪器设备 仪器名称 型号 编号 校验有效期 标准品和试剂 名称 级别 厂家 批号 样品 名称 厂家 批号 验证过程： 色谱条件 色谱柱：agilent ODS-2 长度：250cm ，内径：4.6mm ，填料 C18 ，填料粒度：5μm 检测波长：262nm 柱温：25℃ 进样量：20μl 流速：1.0ml/min 流动相A：0.02mol/l磷酸氢二钠溶液（用磷酸调pH至6.0），流动相B：甲醇 A:B=85:15 停止时间：18min 系统精密度 溶液配制 异烟肼供试品溶液：取异烟肼25mg，置50ml容量瓶中，精密称量，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 系统精密度溶液：精密移取供试品溶液1ml置100ml容量瓶中，用水稀释至刻度。 验证过程及结果 按色谱条件对系统精密度溶液连续进样6针分析，记录异烟肼的保留时间、峰面积。 可接受标准：异烟肼峰面积RSD≤2.0%,保留时间RSD≤2.0%。 序号 保留时间(min) 峰面积 1 2 3 4 5 6 RSD% 结论： 方法精密度 溶液配制 供试品溶液：取异烟肼25mg，，精密称定，置50ml容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度。取同一批号的异烟肼6份，配置6份供试品溶液。 验证程序及结果 每份供试品溶液进1针，记录谱图。按面积归一化法，计算每份样品有关物质，及其相对标准偏差RSD。 序号 有关物质％ 有关物质平均值％ RSD 1 2 3 4 5 6 可接受标准：有关物质RSD≤5.0%。 结论： 最小检测限 溶液配制 供试品溶液：取异烟肼25mg，精密称定，置50ml容量瓶中，用水溶解