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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期
2014 7
吉富罗非鱼源无乳链球菌 - 融合基因的
Sip GAPDH
构建及其原核表达
1，2，3 1，2，3 1，2，3 1，2，3 1，2，3
王蓓 李桂欢 鲁义善 汤菊芬 黄郁葱
吴灶和2，3，4 简纪常1，2，3
（1. 广东海洋大学 水产学院，湛江 524088 ；2. 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室，湛江 524088 ；3. 广东省水产经济
动物病害控制重点实验室，湛江 524088 ；4. 仲恺农业工程学院，广州 510225）
摘 要 ： 利用重叠延伸 （SOEing ）PCR 技术，将吉富罗非鱼 （ ）源无乳链球菌 （ ）
Oreochromis niloticus Streptococcus agalactiae
ZQ0910 株表面免疫原性蛋白（Surface immunogenic protein ，Sip ）基因与甘油醛-3-磷酸脱氢酶 （GAPDH ）基因通过Linker 序列融合，
构建成为 - 融合基因。将其定向克隆至原核表达载体pET-32a （+ ）中，在大肠杆菌BL21 （DE3 ）中进行诱导表达。结果
Sip GAPDH
表明，重组质粒pET-32a-Sip-GAPDH 在大肠杆菌BL21 （DE3 ）中表达后所获得的融合蛋白Sip-GAPDH 分子量为102.0 1 kD ，表达
最佳条件为37 ℃，IPTG 浓度0.1 mmol/L ，诱导5 h 。Western blot 鉴定结果表明融合基因得到了成功表达。
关键词 ： 无乳链球菌 - 融合基因 重叠延伸PCR 技术 原核表达
Sip GAPDH
-
Construction and Prokaryotic Expression Sip GAPDH Fusion Gene of
Streptococcus agalactiae from GIFT Strain of Nile Tilapia
（ ）
Oreoc
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