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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( )
2015, 31 2 :153-159
灰色链霉菌中乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及
酶学性质研究
刘伟娜 梁迪 王晓宇 玉王宁 厚凌宇 金一 谢响明
（北京林业大学生物科学与技术学院，北京 100083）
摘 要 ： 根据GenBank 数据库中已报道的灰色链霉菌 （ ）全基因组序列，分析得到假定的乙酰木聚糖酯
Streptomyces griseus
酶基因序列并设计引物 ；利用分子克隆的方法得到该菌株基因组中乙酰木聚糖酯酶基因，并构建原核表达载体pET28a-Sgraxe ，经
IPTG 诱导表达重组SgrAxe，Ni-NTA 亲和层析法纯化该蛋白。结果显示，克隆得到乙酰木聚糖酯酶基因 ，其序列全长1 008 bp，
axe
编码336 个氨基酸。SDS检测带有pET28a-Sgraxe 转化菌株诱导表达产物相对分子量约为37 kD，与理论值相符。纯化的重
组SgrAxe 酶学性质表明，该酶最适反应温度为50℃，最适pH8.0，热稳定性较强，pH 作用范围广 ；金属离子对酶均表现为抑制作
用，尤其是Zn2+ 严重抑制酶活力 ；重组酶特征的分析揭示了其在工业中潜在的应用价值。
关键词 ： 灰色链霉菌 ；乙酰木聚糖酯酶 ；原核表达 ；纯化；酶学性质
DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.02.023
，
Cloning Expression and Characterization of Acetyl Xylan Esterase
from Streptomyces griseus
Liu Weina Liang Di Wang Xiaoyu Yu Wangning Hou Lingyu Jin Yi Xie Xiangming
（ ， ， 100083 ）
College of Biological Sciences and Technology Beijing Forestry University Beijing
： Primers were designed by putative annotated from the whole genome sequence of . The gene was
Abstract axe Streptomyces griseus axe
firstly cloned and linked to the prokaryotic expression vector, expressed recombinant protein induced with IPTG and purified with the Ni-NTA
affinity chromatography. The results showed the cloned gene axe contained an open reading frame of 1 008 b
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