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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2013年第11期
高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 TA-12 株 ORF6
基因的克隆、鉴定及真核表达
1 1 1 2 1 1 1
王彤彤 汪晓飞 李心安 田国宁 刘立涛 王广文 李宁
1 1 1 1
王方昆 李红梅 赵孝民 肖一红
（1. 山东农业大学动物科技学院，泰安 271018 ；2. 潍坊出入境检验检疫局，潍坊 261041）
摘 要 ： 旨在获得 HP-PRRSV TA-12 （GenBank 登录号 ：HQ4 16720 ）分离株ORF6 蛋白的高效表达，将HP-PRRSV TA-12 分
离株的ORF6 基因克隆到载体PfastBac HTB ，并经转座进入E. coli 含有杆状病毒质粒Bacmid 的DH10BacTM 细胞株，通过蓝白斑筛
选和PCR 鉴定出阳性重组杆粒，再将提取的重组杆粒Bacmid-ORF6 转染昆虫细胞sf9 ，使其表达ORF6 蛋白。经Western blot 鉴定，
在感染重组杆状病毒后第4 天ORF6 蛋白表达量最大，达到0.05 μg/μL。表达的ORF6 蛋白主要存在于细胞质中。
关键词 ： 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF6 蛋白 真核表达
，
Cloning Identification and Eukaryotic Expression of ORF6 Gene
-
from Highly Pathogenic PRRSV Strain TA 12
1 1 ’ 1 2 1 1 1
Wang Tongtong Wang Xiaofei Li Xin an Tian Guoning Liu Litao Wang Guangwen Li Ning
1 1 1 1
Wang Fangkun Li Hongmei Zhao Xiaomin Xiao Yihong
（1. ， ， 27 10 18 ；2. -
College of Animal Science and Technology Shandong Agricultural University Taian Weifang Entry Exit Inspection And
Quarantine Bureau ，Weifang 26104 1 ）
Abstract: To obtain the efficient expression of ORF6 proteins of HP-PRRSV strain TA-
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