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生物技术通报
年第 期
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2008 3
黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶基因的克隆与序列分析
1 1 1 2
杨迪 高艳玲 路福平 周丽娜
1 2
( 天津市工业微生物重点实验室 天津科技大学生物工程学院,天津 ;齐齐哈尔大学生命科学与工程学院,齐齐哈尔 )
300457 161006
摘 要: 以黑曲霉( ) 的总 作为模板,通过 扩增出含自身信号肽的脯氨酸蛋白
A.nigerTCCC41013 RNA RT-PCR
内肽酶基因,将其插入pUCm-T载体上,经PCR和酶切鉴定后进行测序并分析。所克隆的PEP基因全长为 1581bp,编
码 个氨基酸残基,成熟肽为 个氨基酸残基。与 中已报道的 的 序列同源性最高,
526 504 GeneBank A.nigerCBS513.88 PEP
达到99.75%。脯氨酸蛋白内肽酶是一种新型的丝氨酸蛋白酶,黑曲霉PEP与已克隆的其他菌种的PEP同源性不高。
关键词: 脯氨酸蛋白内肽酶 黑曲霉 克隆 序列分析
CloningandSequenceAnalysisofA.nigerProlineSpecific
EndoproteaseGene
1 1 1 2
YangDi GaoYanling LuFuping ZhouLina
(1 , , ,
TianjinKeyLabofIndustrialMicrobiologyCollegeofBiotechnologyTianjinUniversityofScienceTechnologyTianjin
2
300457; , , )
LifeScienceandEngineeringCollegeQiqiharUniversityQiqihar161006
:
Abstract ThetotalRNA from Aspergillusnigerwasextractedandtheprolinespecificendoproteasegene
,
containingitssignalsequencewasamplifiedbyRT-PCRandtheninsertedintopUCm-T vector.Therecombinant
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