图像反卷积复原技术在玉米45SrDNA转录图式研究中的运用.pdfVIP

武汉植物学研究2007，25(6)：612—618 Journa／ofWuhanBotanicalResearch 图像反卷积复原技术在玉米 45SrDNA 转录图式研究中的运用 温若愚，唐燕城，马璐，李立家 (武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室，武汉 430072) 摘 要：由于成像焦平面外杂光的干扰，宽场荧光显微镜所得的图像往往较模糊，使其不适合用来观察植物细胞核 内的精细结构。该实验讨论了反卷积软件中对图像复原结果有较大影响的几个重要参数的设置。经过合适的图 像反卷积复原 ，由宽场荧光显微镜获取的玉米45SrRNA原位杂交信号图像得以清楚显示。对所得杂交图像的分 析表明：玉米45SrDNA转录往往先发生在核仁外围，且随着核仁转录活性的提高逐渐向核仁内部扩散，并最终与 5SrRNA一起，在核仁内部的空洞结构中形成成熟rRNA。研究结果显示，反卷积复原可有效提高宽场荧光显微镜 所得二维图像的分辨率 ，从而使宽场荧光显微镜在植物细胞核内精细结构研究中发挥更多的作用。 关键词：反卷积；45SrDNA转录；ImageJ软件 中图分类号 ：Q-334 文献标识码 ：A 文章编号：1000．470X(2007)06．0612．07 TheApplication oftheImageDeconvolutionTechniquetotheStudyof theM aize45SrDNA TranscriptionPattern WEN RUO—Yu，TANGYan．Cheng，MA Lu，LILi．Jia (KeyLaboratoryofMOEforPlantDevelopmentalBioolgy，Collegeof Sciences，WuhanUniversity，Wuhan 430072，China) Abstract：Duetotheeffectoftheout．of-focusfluorescence。imagesgainedbyawide—fieldfluorescence microscopewereusuallytoohazytobeused in observingthefinestructureoftheplantnuclei．Inthis study．wediscussed severalimportantparameterswhichheavilyaffecttheresultsofimagedeconvolution． Afterproperimagedeconvolution restoration．the imagesofthemaize45SrRNA situ hybridization signalswereclearlydisplayed．Theanalysisofthehybridizationimag esshowedthathtetranscriptionofhte maize45SrDNA genewasinitiatedinthedensefibrillarcomponent (DFC)。thentrnasferredtothe nucleolusinnerspaceasthenucleolustrna scription activity increased．and finally combinedwith the 5SrRNA toform thematurerRNA inthenucleoluscavity．Theresultsshowedthattheapplicationofthe imagedeconvolutionrestorationtechniquecouldeffectivelyimprovetheresolution ofthetwo．dimensional image gained by a wide．field fluorescence microscope．and thUSmade the wide．field fluorescence microscopesmoreusefulinobesrvingthefi