蜂胶黄酮对CD44CD25%2b调节性T细胞的影响及其和动脉粥样硬化的关系.pdfVIP

蜂胶黄酮对cD4+cD25+调节性T细胞的影晌及与 动脉粥样硬化的关系 研究生：王文明 专 业：心血管内科学 导 师：李秀昌副教授 中文摘要 引言 既往研究表明蜂胶黄酮具有确切的抗动脉粥样硬化功能，其作用机制也 硬化具有抑制作用，蜂胶黄酮是否通过影响cD4+cD25+调节性T细胞的数 量和／或功能从而发挥抗动脉粥样硬化的作用，目前尚未见报道。本研究通过 实验动物模型探讨蜂胶黄酮对cD4+cD25‘调节性T细胞及动脉粥样硬化的 影响。 目的 进一步验证蜂胶黄酮的抗动脉粥样硬化作用；3．明确蜂胶黄酮是否通过影响 CD4+CD2 5+调节性T细胞的数量和／或功能，从而发挥抗动脉粥样硬化作用。 方法 用超声波辅助乙醇提取法提取蜂胶黄酮，采用硅胶柱层析纯化蜂胶总黄 酮，分光光度计法鉴定蜂胶黄酮纯度。利用7．8周龄雄性ApoE。小鼠建立 动脉粥样硬模型，随机分为4组，每组l 0只。分别为：1．高脂组(HL组)： 高脂饲料饲养；2．正常对照组(Nc组)：普通饲料饲养；3．高脂+蜂胶黄酮 组(HP)：高脂饲料饲养并且给予蜂胶黄酾3 00mg．kg一．d-】；4．蜂胶黄酮组(PF 组)：普通饲料饲养并给予蜂胶黄酮3 Oomg．kg～．d-I。连续灌胃给药14周， 内眦静脉取血，离心获得血清，然后采用生化分析仪检测其中甘油三脂(TG)、 蛋臼(VLDL)浓度；硝酸还原酶法检测血清一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶 血管内皮生长因子(VEGF)浓度：取小鼠整条动脉，进行油红O染色分析 整条主动脉AS斑块面积占整条主动脉面积的比例；取小鼠脾脏研磨、过滤 获得脾细胞后进行原代细胞培养，培养24小时后进行流式细胞术检测 mRNA以RT—PCR法检钡0 Foxp3mRNA表达。 结果 6．04士1．41 HL组1 mmol／L，HP组13．97士1．34 mmol／L、NC组10．OO士1．51 mmol／L，PF组6．92士1．04 浓度显著高于PF组，差异均有统计学意义(尸均0．05)。 别是：HL组11．05士1．81 mmol／L，HP组8．82士0．91 mmol／L，NC组7．38士1．04 mmol／L， PF组6．16士0．96 浓度显著高于PF组，差异均有统计学意义(尸o．05)。 87．40士6．56umol／L、80．38士6．75u!nol／L、8O．18±7．1 3umol／L、7 3 1．6士6．1umol／L。 学意义(尸均O．05)。 (3)PF组血清TNOS浓度(20．1 4士5．99U／mL)显著低于HL组(45．48土7．38 U／mL)、HP组(40．32士5．91U／mL)、NC组(3 6．70士5．70U／mL)，差异有统计 学意义l尸均O．05)。 PF组血清iNOS浓度(1 5．06士3．34U／1nL)显著低于HL组(39．11士5．25)、 HP组(34．49士2．80U／mL)和NC组(3 1．66士2．73U／mL)，方差分析表明差异 均有统计学意义(尸均O．05)。 (PO．05)，HP组与NC组间血清TNO