希茉莉（HameliapatensJacq.）花粉发育时期快速检测.pdfVIP

植物科学学报　 ２０１４ꎬ３２(４):４２１~４２６ Ｐｌａｎｔ ＳｃｉｅｎｃｅＪｏｕｒｎａｌ 　 　 ＤＯＩ: １０３７２４/ ＳＰＪ１１４２２０１４４０４２１ 希茉莉(Ｈａｍｅｌｉａ ｐａｔｅｎｓ Ｊａｃｑ.)花粉发育时期快速检测 １ꎬ２ １∗ １ 岳 琳 ꎬ 匡延凤 ꎬ 廖景平 (１. 中国科学院华南植物园ꎬ 中国科学院资源保护与可持续利用重点实验室ꎬ 广州 ５１０６５０ꎻ ２. 中国科学院大学ꎬ 北京 １０００４９) 摘　 要:茜草科希茉莉(Ｈａｍｅｌｉａ ｐａｔｅｎｓＪａｃｑ.)的花粉用 ＤＡＰＩ(４’ꎬ６￣ｄｉａｍｉｄｉｎｏ￣２￣ｐｈｅｎｙｌｉｎｄｏｌｅ)直接染色不能观 察到花粉核ꎬ 本研究探索出适宜在ＤＡＰＩ染色前处理希茉莉花粉壁的水浴加热￣氧化方法ꎬ 使得希茉莉花粉核能 在荧光显微镜下清晰地显示出来ꎬ 从而快速检测花粉所处的发育阶段ꎮ 结果表明: (１)单核花粉和二核花粉最适 宜的水浴加热温度和时间分别为６５℃、 ２０ ~５０ ｍｉｎ和５５℃、 ２０ ~４０ ｍｉｎꎻ (２)花粉发育阶段与花朵、 花药长 度的对应关系为: 花朵０９０ ~ １００ ｃｍ、 花药０５０ ~０６０ｃｍ时对应花粉的四分体时期ꎬ花朵１１０ ~ １６０ｃｍ、 花药０６０ ~０８５ ｃｍ时对应单核花粉时期ꎬ 花朵 １８０ ~２７０ ｃｍ(花冠裂片张开前)、 花药０９１ ~ １０１ｃｍ 时对应二核花粉时期ꎮ 关键词:希茉莉ꎻ 花粉发育ꎻ ＤＡＰＩ(４’ꎬ６￣ｄｉａｍｉｄｉｎｏ￣２￣ｐｈｅｎｙｌｉｎｄｏｌｅ) 中图分类号:Ｑ９４４４２　 　 　 　 　 文献标识码:Ａ　 　 　 　 　 文章编号:２０９５￣０８３７(２０１４)０４￣０４２１￣０６ Ｑｕｉｃｋ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｌｌｅｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｓｔａｇｅｓ ｏｆ Ｈａｍｅｌｉａ ｐａｔｅｎｓ Ｊａｃｑ. １ꎬ２ １∗ １ ＹＵＥ Ｌｉｎ ꎬＫＵＡＮＧＹａｎ￣Ｆｅｎｇ ꎬＬＩＡＯＪｉｎｇ￣Ｐｉｎｇ (１. Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅ ＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎꎬＳｏｕｔｈ Ｃｈｉｎａ Ｂｏｔａｎｉｃａｌ ＧａｒｄｅｎꎬＣｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＧｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６５０ꎬＣｈｉｎａꎻ２. Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＢｅｉｊｉｎｇ １０００４９ꎬＣｈｉｎａ) Ａｂｓｔｒａｃｔ:ＤＡＰＩ ｉｓ ａ ＤＮＡ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｆｌｕｏｒｏｃｈｒｏｍｅ ｔｈａｔ ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｓ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｕｃｌｅｉ ｄｕｒｉｎｇ ｐｏｌｌｅｎ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｃａｎ ｃｏｎｆｉｒｍｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｓｔａｇｅｓ ｏｆ ｐｏｌｌｅｎ ｇｒａｉｎｓ. Ｈｏｗｅｖｅｒꎬｔｈｅ ｎｕｃｌｅｉ ｉｎ Ｈａｍｅｌｉａ ｐａｔｅｎｓＪａｃｑ. ｐｏｌｌｅｎ ｇｒａｉｎｓ ａｒｅ ｌｉｔｔｌｅ ｓｔａｉｎｅｄ ｂｙ ＤＡＰＩｄｕｅｔｏｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｌｌｅｎｗａｌｌ.Ａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅ “ｗａｔｅｒ￣ｂａｔｈ ｈｅａｔｉｎｇ ａｎｄ ｏｘｉｄａｔｉｏｎ” ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｔｒｅａｔ ｔｈｅ ｐｏｌｌｅｎ ｗａｌｌ ｏｆ Ｈ. ｐａｔｅｎｓ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ: (１) ｂｅｓｔ ｉｎｃｕｂａｔｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｕｎｉｎｕｃｌｅａｔｅ ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｅｓａｎｄ ｂｉｃｅｌｌｕｌａｒｐｏｌｌｅｎｇｒａｉｎｓｗｅｒｅ２０~５０ ｍｉｎａｔ６５°Ｃａｎｄ２０~４０ ｍｉｎ ａｔ ５５°Ｃꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌ