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水牛精子蛋白质组双向电泳体系的建立和优化.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2012 1 水牛精子蛋白质组双向电泳体系的建立和优化 1,2 1 1 1 1 1 薛雯 杨丽 付强 刘振方 张明 卢克焕 1 ( 广西大学 动物繁殖研究所亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁 530004 ; 2广西桂林解放军第 181 医院肾脏科,桂林 541002) 摘 要 : 建立和优化一种适合水牛精子蛋白质组学研究的双向电泳技术。以水牛精子为研究对象,比较两种不同配方的 - 裂解液,以及不同上样量对其 2 DE 图谱质量的影响。结果显示 , 以 7 mol/L 尿素、2 mol/L 硫脲、4 % CHAPS 、1 % DTT、0.5 % μ - - Cocktail of protease inhibitors 为裂解液,24 cm 胶条上样量 200 g 时,可获得较好的精子总蛋白质 2 DE 图谱。运用 ImageMaster 2 D platinum 分析软件检测出约 500 个蛋白质点,蛋白质大部分分布在等电点 5-7 之间,分子量范围约 40-90 kD 。 关键词 : 水牛 精子 双向电泳 蛋白质组学 裂解液 - Establishment and Optimization of a Two Dimensional Electrophoresis Technique for Proteome of Buffalo Sperm 1,2 1 1 1 1 1 Xue Wen Yang Li Fu Qiang Liu Zhenfang Zhang Ming Lu Kehuan 1 - (State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro bioresources, Animal Reproduction Institute, Guangxi University, Nanning 530004 ; 2 Nephrology Department

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