受体在非洲爪蟾卵母细胞上表达方法的优化.pdfVIP

受体在非洲爪蟾卵母细胞上表达方法的优化.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2013 6 受体在非洲爪蟾卵母细胞上表达方法的优化 房立丛  沈立姿  于津鹏  朱晓鹏  胡远艳  张本  罗素兰  长孙东亭 (海南大学 热带生物资源教育部重点实验室 海口市海洋药物重点实验室,海口 570228) 摘 要 : 通过改变非洲爪蟾卵母细胞的消化时间、消化次数、消化用酶量等,优化乙酰胆碱受体的表达条件。结果显示, 采用两步消化法,在经过0.5 mg/mL 的胶原酶消化50-70 min 之后得到的非洲爪蟾卵母细胞的状态较好,利于受体的表达 ;同时优 化了受体在非洲爪蟾卵母细胞上的表达条件。试验所获得的优化表达条件对建立非洲爪蟾卵母细胞受体表达体系具有重要意义。 关键词 : 非洲爪蟾卵母细胞 乙酰胆碱受体 表达 优化 Optimization of Receptors Expressed on Xenopus laevis Oocytes Fang Licong Shen Lizi Yu Jinpeng Zhu Xiaopeng Hu Yuanyan Zhang Ben Luo Sulan Zhangsun Dongting (Key Laboratory of Trop ical Biological Resources of Ministry of Education ,Key Lab f or Marine Drugs of Haikou , Hainan University ,Haikou 570228 ) Abstract:  It was to optimize the conditions of AChRs expressed on Xenopus laevis oocytes, including the oocytes ’ digestion time, frequency and the amount of collagenase. Results showed that when using two-step digestion method and 0.5 mg/mL concentration of collagenase, the isolated Xenopus laevis oocytes was beneficial to express AChRs. The conditions of receptor expression on the oocytes were also optimized. The optimized expression methods are significant to set up the expression system of AChRs on Xenopus laevis oocytes, which are the basis for screening new drugs to target AChRs with this experimental model. Key words:  Xenopus laevis oocytes Acetylcholine receptor Expression Optimization 非洲爪蟾 (South African clawed toad )生长于南 况 。为有效解决上述 问题 ,本研究 以乙酰胆碱受体 非 ,其 卵母 细胞 体 型较 大 ,直径 可达 1.0-1.2 mm , 为例 ,通过优化爪蟾卵母细胞消化时间、消化次数 、 能有效地表达外源性基 因编码 的受体蛋 白,所表达

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