斑马鱼两种转基因方法的比较.pdfVIP

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2011年第12期 斑马鱼两种转基因方法的比较 柳晓瑜 王豪博 仇雪梅 于旭蓉 刘洋 王秀利 （大连海洋大学生命科学与技术学院，大连 116023） 摘 要: 对斑马鱼（Danio rerio ）的两种转基因方法进行比较，分别采用显微注射和电脉冲导入法将携带有GFP 报告基因 的表达载体质粒导入斑马鱼受精卵，得出电脉冲最佳导入条件为最适电压 125 V/cm，电阻 50 Ω，最佳导入时期为 1-2 细胞期 （40-50 min ），以及最佳外源基因浓度为 300 ng/μL 。利用两种方法均得到转 GFP 基因的斑马鱼，而两种方法对比的结果表明，显 微注射法耗时费力，但转基因阳性率高 ；电脉冲法一次可以处理大批量受精卵，但转基因阳性率远低于显微注射法。 关键词: 斑马鱼 显微注射 电脉冲导入法 转基因效率 Studies on Two Methods for Tansgenic Zebrafish Liu Xiaoyu Wang Haobo Qiu Xuemei Yu Xurong Liu Yang Wang Xiuli （ ， ， 116023 ） College of Life Science and Technology Dalian Ocean University Dalian Abstract: This paper compared and research the relative efficiency of gene transfer into zebrafish by microinjection and electroporation. The electroporation conditions field strength of 125 V/cm，resistance of 50 Ω，optimal period of one and two cell stage（40-50 min）of fertilized fish eggs and foreign DNA concentration of 300 ng/μL were applied for mass gene transfer. We can obtain transenic zebrafish by - microinjection and electroporation. The result showed that the microinjection have high positive rate，but difficult and time consuming .While the electroporation can handle a large number of zygotes one time but have low positive rate . Key words: Zebrafish Microinjection Electroporation Transgenic efficiency ［1］ 此外，反转录病毒介导法 ［7］ ［8］ 自 20 世纪 80 年代首批转基因鱼诞生以来 ， 、脂质体介导法 、 世界范围内掀起了转基因鱼研究的热潮，很多实验