烟草C3HC4型锌指蛋白的原核表达及其转基因植株功能的研究.pdfVIP

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2016-11-15 发布于安徽
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烟草C3HC4型锌指蛋白的原核表达及其转基因植株功能的研究.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第期 2014 7 烟草 C3HC4 型锌指蛋白的原核表达及转基因植株功能研究 1，2 1 2 1 伍文宪杨秀芬刘勇邱德文（1. 中国农业科学院植物保护研究所，北京 100081 ；2. 四川省农业科学院植物保护研究所，成都 610066）摘要：植物中C3HC4 型RING 锌指蛋白在泛素化、光形态建成、抗逆及生长发育等过程中均起到非常重要的作用。首次从本生烟中扩增获得一个锌指蛋白基因的完整阅读框，编码203 个氨基酸，含有C3HC4 型锌指结构域，命名为 ZFP 1。将 Nb NbZFP1 基因分别克隆到原核表达系统载体pGEX-6P-2 以及pMAL-C2X 中，成功构建了重组表达载体pGEX-6P-2-NbZFP 1 与pMAL- C2X-NbZFP 1，经IPTG 获得了大量可溶性表达的 ZFP 1 融合蛋白。将基因克隆于植物表达载体pBI121 中，通过农杆菌介 Nb NbZFP1 导法获得转基因烟草，PCR 检测及Southern blot 分析表明NbZFP1 基因已整合到烟草基因组中，转NbZFP1 基因烟草表现出株型紧凑，节间缩短，茎干粗壮和对TMV 抗性增强。关键词：锌指蛋白重组表达转基因烟草抗病性 - Prokaryotic Expressing and Functional Analysis of C3HC4 type Zinc Finger Protein in Nicotiana benthamiana 1，2 1 2 1 Wu Wenxian Yang Xiufen Liu Yong Qiu Dewen （1. Institute of Plant Protection ，Chinese Academy of Agricultural Sciences ，Beij ing 100081 ；2. Institute of Plant Protection ， Sichuan Academy of A