箭叶淫羊藿EsUF3GT基因的克隆及表达分析.pdfVIP

植物科学学报　 ２０１４ꎬ３２(６):６０２~６１１ Ｐｌａｎｔ ＳｃｉｅｎｃｅＪｏｕｒｎａｌ － 　 　 ＤＯＩ:１０１１９１３/ ＰＳＪ２０９５ ０８３７２０１４６０６０２ 箭叶淫羊藿 ＥｓＵＦ３ＧＴ基因的克隆及表达分析 １ꎬ２ １ １∗ 王应丽 ꎬ黄文俊 ꎬ王 瑛 (１. 中国科学院植物种质创新与特色农业重点实验室ꎬ中国科学院武汉植物园ꎬ武汉 ４３００７４ꎻ２. 中国科学院大学ꎬ北京 １０００４９) 摘　 要:类黄酮３￣Ｏ￣糖基转移酶(ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ３￣Ｏ￣ｇｌｕｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅꎬ ＵＦ３ＧＴ)可以把不稳定的花色素催化成花 色素苷ꎮ 本研究采用同源基因克隆技术获得箭叶淫羊藿 Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍ ｓａｇｉｔｔａｔｕｍ (Ｓｉｅｂ. ａｎｄ Ｚｕｃｃ.) Ｍａｘｉｍ. ＵＦ３ＧＴ基因ｃＤＮＡ 开放阅读框(Ｏｐｅｎ Ｒｅａｄｉｎｇ Ｆｒａｍｅꎬ ＯＲＦ)序列ꎬ 命名为 ＥｓＵＦ３ＧＴ(ＧｅｎＢａｎｋ 注册号为 ＫＪ６４８６２０)ꎮ 序列分析表明ꎬ 该基因ＯＲＦ全长为１３５６ ｂｐꎬ 编码４５１个氨基酸ꎬ 与其它植物中ＵＦ３ＧＴ蛋白序列 的相似性为４０％~５０％ꎮ 进化树分析发现ꎬ ＥｓＵＦ３ＧＴ同催化类黄酮３￣Ｏ糖基化的糖基转移酶聚为一枝ꎮ ｑＲＴ￣ ＰＣＲ分析结果显示ꎬ ＥｓＵＦ３ＧＴ在花中的表达量最高ꎬ 约为叶片、 花蕾中表达水平的２３倍ꎬ 果实及根中表达水 平的１９倍ꎮ 花青素含量检测表明ꎬ 花蕾中的含量最高(１３０４ ｍｇ/ １００ ｇ)ꎬ 分别是叶片、 花、 果实及根中含量 的３５、 ５２、 ７２、 ８７倍ꎮ 我们推测 ＥｓＵＦ３ＧＴ参与了箭叶淫羊藿花色素苷的生物合成ꎬ 此结果为深入开展 Ｅｓ￣ ＵＦ３ＧＴ的生化功能研究奠定了基础ꎮ 关键词:箭叶淫羊藿ꎻ 花色素苷ꎻ 类黄酮３￣Ｏ￣糖基转移酶(ＵＦ３ＧＴ) 中图分类号:Ｑ７８　 　 　 　 　 文献标识码:Ａ　 　 　 　 　 文章编号:２０９５￣０８３７(２０１４)０６￣０６０２￣１０ Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＡｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ＥｓＵＦ３ＧＴＧｅｎｅ ｉｎ Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍｓａｇｉｔｔａｔｕｍ (Ｓｉｅｂ. ａｎｄ Ｚｕｃｃ.) Ｍａｘｉｍ. １ꎬ２ １ １∗ ＷＡＮＧＹｉｎｇ￣Ｌｉ ꎬＨＵＡＮＧＷｅｎ￣Ｊｕｎ ꎬＷＡＮＧＹｉｎｇ (１. Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅꎬ Ｗｕｈａｎ Ｂｏｔａｎｉｃａｌ ＧａｒｄｅｎꎬＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ ＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＷｕｈａｎ４３００７４ꎬＣｈｉｎａꎻ２. Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＢｅｉｊｉｎｇ １０００４９ꎬＣｈｉｎａ) Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ３￣Ｏ￣ｇｌｙｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ (ＵＦ３ＧＴ) ｃａｎ ｃａｔａｌｙｚｅ ｕｎｓｔａｂｌｅ ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ ｉｎｔｏ ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎ. Ｉｎｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙꎬｔｈｅ Ｏｐｅｎ Ｒｅａｄｉｎｇ Ｆｒａｍｅ (ＯＲＦ) ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ＵＦ３ＧＴ ｇｅｎｅꎬｄｅｓｉｇｎａｔｅｄ ａｓ ＥｓＵＦ３ＧＴꎬｗａｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍ ｓａｇｉｔｔａｔｕｍ (Ｓｉｅｂ. ａｎｄ Ｚｕｃｃ.) Ｍａｘｉｍ. ｕｓｉｎｇ ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ ｇｅｎｅ ｃｌｏｎｉｎｇ. Ｔｈｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｗａｓ ｌｏｇｇｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ＧｅｎＢａｎｋ ｄａｔａｂａｓｅ ｗｉｔｈ ａｎ ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ. ｏｆ ＫＪ６４８６２０. Ｉｔｓ ｃＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ａ １３５６ ｂｐ