葡萄COR27基因的克隆与抗寒功能研究.pdfVIP

植物科学学报　 ２０１５ꎬ３３(３):３４６~３５４ Ｐｌａｎｔ ＳｃｉｅｎｃｅＪｏｕｒｎａｌ － 　 　 ＤＯＩ:１０１１９１３/ ＰＳＪ２０９５ ０８３７２０１５３０３４６ 葡萄ＣＯＲ２７基因的克隆与抗寒功能研究 １ꎬ２ ２ ３ ２ ２∗ １∗ 范高韬 ꎬ 孙小明 ꎬ 任小蝶 ꎬ 李绍华 ꎬ 辛海平 ꎬ 王万军 (１.西南交通大学生命科学与工程学院ꎬ 成都 ６１００３１ꎻ ２. 中国科学院植物种质创新与特色农业 重点实验室ꎬ 中国科学院武汉植物园ꎬ 武汉 ４３００７４ꎻ ３. 中国地质大学环境学院ꎬ 武汉 ４３００７４) 摘　 要:冬季低温是制约我国葡萄和葡萄酒产业发展的主要因素之一ꎬ 揭示葡萄在冷胁迫下的信号转导通路、 挖 掘抗寒相关基因并解析其功能ꎬ 对高耐寒品种的培育具有重要的理论和应用价值ꎮ 本研究在欧亚种‘玫瑰香’葡 萄(Ｖｉｔｉｓ ｖｉｎｉｆｅｒａ Ｌ. ‘Ｍｕｓｃａｔ Ｈａｍｂｕｒｇ’)冷胁迫相关转录组分析的基础上ꎬ 鉴定了一个抗寒候选基因ꎬ 通过同源 性分析将其命名为 ＶｖＣＯＲ２７ꎮ ＶｖＣＯＲ２７基因的ｃＤＮＡ序列(１０８２ ｂｐ)中ꎬ 其开放阅读框(ＯＲＦ)为９０９ ｂｐꎬ 编 码３０２个氨基酸ꎮ 同源性分析显示ꎬ １３个物种的ＣＯＲ２７蛋白均具有３个特有的保守结构域ꎮ 定量 ＲＴ￣ＰＣＲ分 析表明ꎬ ＶｖＣＯＲ２７在４℃低温处理２４ ｈ后大量表达ꎮ 基于基因组序列的启动子基序分析表明ꎬ ＶｖＣＯＲ２７启动 子区均只含有 １个 ＥＥ、 ＥＥＬ、 Ｇ￣ｂｏｘ、 ＡＢＲＥＬ元件ꎬ 其数量少于ＡｔＣＯＲ２７ꎬ 这可能是 ＶｖＣＯＲ２７响应冷胁迫较 ＡｔＣＯＲ２７滞后的原因ꎮ 对３个超表达 ＶｖＣＯＲ２７转基因拟南芥株系的抗寒性鉴定表明ꎬ ＶｖＣＯＲ２７参与了植株对 冷胁迫的应答并作为正调控因子增强了植株对冷胁迫的耐受能力ꎮ 关键词:葡萄ꎻ ＣＯＲ２７基因ꎻ 冷处理ꎻ 抗寒性ꎻ 转基因拟南芥 中图分类号:Ｑ９４３２ꎻ Ｓ６６３１　 　 　 　 　 文献标识码:Ａ　 　 　 　 　 文章编号:２０９５￣０８３７(２０１５)０３￣０３４６￣０９ Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＡｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＣＯＲ２７ｆｒｏｍ Ｖｉｔｉｓ ｖｉｎｉｆｅｒａ １ꎬ２ ２ ３ ２ ＦＡＮ Ｇａｏ￣Ｔａｏ ꎬＳＵＮＸｉａｏ￣Ｍｉｎｇ ꎬＲＥＮＸｉａｏ￣Ｄｉｅ ꎬＬＩＳｈａｏ￣Ｈｕａ ꎬ ２∗ １∗ ＸＩＮ Ｈａｉ￣Ｐｉｎｇ ꎬＷＡＮＧＷａｎ￣Ｊｕｎ (１. Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅａｎｄ ＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇꎬＳｏｕｔｈｗｅｓｔＪｉａｏｔｏｎｇ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＣｈｅｎｇｄｕ６１００３１ꎬＣｈｉｎａꎻ ２. Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅꎬ Ｗｕｈａｎ Ｂｏｔａｎｉｃａｌ Ｇａｒｄｅｎꎬ ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＷｕｈａｎ４３００７４ꎬＣｈｉｎａꎻ３. Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｓｔｕｄｉｅｓꎬ Ｃｈｉｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ＧｅｏｓｃｉｅｎｃｅｓꎬＷｕｈａｎ４３００７４ꎬＣｈｉｎａ) Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｌｏｗ ｗｉｎｔｅｒ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｉｓ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｆａｃｔｏｒｓ ｔｈａｔ ａｆｆｅｃｔ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ