脂肪乳实验介绍.docx

第2章 脂肪乳制备技术 一、教学要求 1．掌握生物分离科学的进展、相关项单元操作技术的基本原理。 2.掌握实验方案设计的基本原则，学会实验方案设计的基本方法。 3．熟练地实施设计方案，优化实验条件。 4．掌握所学技术、方法在药学研究中的应用。 5. 掌握实验数据的统计与处理，学会实验图表的制作方法以及实验结果分析讨论 二、教学学时 计划课内64学时，其中讲授8学时、实验研究56学时。计划课外16学时，其中文献综述10学时、以小组为单位答疑2学时，集中论文交流4学时） 三、讲授的内容 1．载药脂肪乳的组成以及在药物制剂中的研究进展。 2．脂肪乳制备的基本流程和原则。 3．各实验的基本原理，操作步骤和注意事项。 4. 标准曲线的制作方法和要求， 5．在本模块基础上开展蛋白质研究的思路和常用技术、方法。 6. 实验设计和实施的基本的基本要求、注意事项。 四、研??课题 1．氯维地平脂肪乳制剂的处方研究 2．氯维地平脂肪乳制剂的工艺优化 3. 氯维地平脂肪乳制剂的表征及质量评价 4. 氯维地平脂肪乳制剂的稳定性研究 五、主要单元操作技术与设备 1、单元操作技术：剪切乳化、高压均质、微射流 2、主要设备：高剪切分散乳化机、高压微射流纳米分散仪、高压纳米均质机、Zetasizer/Nano-ZS90激光粒度仪、全自动不锈钢立式电热蒸汽消毒器、磁力搅拌器、烘箱、真空干燥箱、分析天平、电子台秤、制冰机、、紫外-可见光分光光度计、荧光分光光度计、高效液相色谱等。 六、教学组织方式 两人一组，所有实验由学生设计方案，独立完成。 七、教学的重点和难点 1、学习的自主性加大，审核学生的实验方案、提供必要的条件。 2、讲授部分的难点是进展、制备思路、原则和常用技术、方法的学习。 3、本模块涉及的仪器特别多，技术方法多，学习难度较大，力求与理论课的对接、举一反三。 八、难点的解决办法： 1、认真备课，该讲的讲深、讲透，重点一对一答疑。 2、做好设计报告的审核，提前一个月做好仪器检修和药品的准备。 3、做好必要的单元操作示教和研究过程的现场指导。 九、相关参考书 1、孙彦，生物分离工程； 2、严希康，生化分离技术； 3、谭天伟，生物分离技术 4、李建武，生物化学原理和方法； 5、生物分离工程实验指导 2—1氯维地平脂肪乳的处方研究 材料与方法 1 实验材料 T-18basic高剪切分散乳化机（IKA）； M100 PCE高压微射流纳米分散仪（Microfluidics，USA）； 高压纳米均质机（广州聚能生物科技有限公司） YM50全自动不锈钢立式电热蒸汽消毒器（上海三申）； DF-101S磁力搅拌器（郑州长城科工贸有限公司）； Zetasizer/Nano-ZS90激光粒度仪（Malvern，英国）； 蛋黄卵磷脂（Lipoid E80，供注射用） 甘油（江西益普生药业有限公司，供注射用） EDTA-2Na（阿拉丁） 油酸（Lipoid，供注射用） 油酸钠（Lipoid，供注射用）； 2 实验方法 通过单因素实验，以外观、粒径、粒径分布、zeta电位、游离脂肪酸等指标来评价，研究并探讨了油相、稳定剂以及抗氧剂对氯维地平脂肪乳的影响。 2.1处方组分的选择 以美国FDA批准上市的氯维地平静脉注射用脂肪乳处方为参考（见下表），在此基础上，选择对制剂影响较大的关键组分进行优化。 美国 FDA 批准上市的氯维地平静脉注射用脂肪乳处方 2.1．1油的种类和用量考察 大豆油和 MCT 是脂肪乳常用的油相，以基础处方作为基本处方，改变油相，制备氯维地平脂肪乳，考察不同油相比例对乳剂的粒径等稳定性指标的影响。 2.1.2稳定剂的种类和用量考察 油酸、油酸钠是乳剂中常用的的稳定剂，以基础处方作为基本处方，改变稳定剂的种类和用量，制备氯维地平脂肪乳，分别考察不同稳定剂及其用量对乳剂的粒径等稳定性指标的影响。 2.1.3抗氧剂的种类和用量考察 由于脂肪乳中油和磷脂均易于空气中氧气反应，所以加入抗氧剂保护。选用注射液中常用的水溶性抗氧剂硫代硫酸钠、脂溶性抗氧剂 VE 以及两亲性抗氧剂硫辛酸进行对比，以基础处方作为基本处方，改变抗氧剂的种类和用量，制备氯维地平脂肪乳，然后在 60℃条件下放置 10 天，取样测定粒径、PDI、zeta 电位等各项指标，考察抗氧剂种类对氯维地平脂肪乳稳定性的影响，并进一步研究其最适合的用量。 2.1.4 EDTA-2Na 的用量 在脂肪乳的制备过程中，尤其是剪切、匀质等过程，容易引入微量金属离子，金属离子会促进油脂氧化。金属离子螯合剂 EDTA-2Na 能与微量金属离子络合，具有提高油脂抗氧化及防止变色的作用。参考相关文献以及美国 FDA 批准上市的处方选择用量 0.005% 质量的评价指标及方法