细胞内蛋白质降解(高级生化课件).ppt

* * * * * Integral transiently bound * * * proteasome * * target * Nucleophile subunits proteasome cap * * Necrosis apoptosis chromatin clumping swollen organelles flocculent mitochondria Mild convolution chromatin compaction and segregation conclensation of cytoplasm Nuclear fragmentation blebbing apoptotic bodies Disintegration release of intracellular contents inflammation Phagocytosis phagocytic cell * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * Free pancreatic trypsin inhibitor * * * Aspartyl proteases * * Adamts * lon * 从大肠杆菌的ClpAP蛋白酶由ATP结合的监管组件，CLPA（亚基议员，84165），和蛋白水解成分，CLPP（亚基议员21563）。我们的流体动力学的研究表明，这些蛋白质在溶液中的主要形式，通过电子显微镜观察到的那些对应。 CLPP和proClpP（SA），在电子显微镜照片显示布置在环的7亚基亚基通过超速离心，被发现有S20中，w值12.2和13.2小号和分子量为300000和324000±3000，分别表示的原始形式。每个由两个这样的环。中分离的两个完整的环CLPP≥0.1M的在低温下的硫酸的存在下，这表明环环接触是极性性质，并更容易打乱比亚基在单个环接触。沉降平衡分析表明CLPA没有核苷酸作为与家的单体和二聚体的平衡混合物存在纯化=（1.0±0.2）×105 M-1和后，加入MgATP或腺苷5-O-（3 - 硫代三磷酸） CLPA亚基的一种形式。先生505000±5000，电子显微镜所看到的六聚体结构。沉淀速度和凝胶过滤分析表明，紧密结合的碱基促进CLPA（S20的六聚体时，w = 17.2 S）与S20中，w值21和27的S（F/F0 = 1.5和1.8，分别CLPP生产物种）显示一个的单tetradecamer的中华电力与一个或两个CLPA的六凯塞尔等电子显微照片ClpAP。 （1995）J.分子生物学。 250，587-594]。在存在ATP和Mg2 +，表观解离常数六聚CLPA和tetradecameric的CLPP的测定条件下的时间是4±2纳米。通过连续变化的方法，CLPA以CLPP活性络合物的最佳比例为2:1。过量的其它成分的存在下，在确定的具体活动限制CLPA和CLPP的表明第二个分子的CLPA提供很少的额外的CLPP激活。 * * * Apoplast vacuole * * * * * * * * * * 细胞周期确定为四个期：DNA合成前期(G1期)，DNA合成期(S期)，DNA合成后期(G2期)和分裂期(M期)。 * * * * * * * * Cathepsins组织蛋白酶 * * * 已命名的caspase家族成员均已被克隆，不但具有氨基酸序列同源性，而且空间结构也很相似。根据caspase-1（ICE）和caspase-3（CPP32）的X-射线晶体图像，大亚基的C-端和小亚基的N-端共200多个氨基酸残基的序列尤为保守，组成相似的β折叠中心和相邻的α-螺旋。 以caspase-1为例，它的活性中心由Cys-285、His-237和Gly-238组成，Arg-197、Arg341、Gln383和Ser347组成底物结合袋。 活性中心Cys近旁的序列也十分保守，一般是QACRG，在caspase-8和caspase-10中为QACQG，在caspase-9中为QACGG，其中的差异不影响它们的剪切活性的特异性。 除了与细胞死亡有关的蛋白酶granzyme（颗粒酶） B之外，只有caspase自己能激活pro-caspase。至少有几种pro-caspase有很低的酶促活性，当它聚集之后就启动自我加工。一旦有了活化的caspase，就像引发雪崩一样使其它的pro-caspase活化。 caspase进行自我切割和作用于其它靶蛋白时优先识别的四肽序列，P1位必须是Asp，P4位大多数为大的疏水残基，P2和P3变化较大（见表5.4），这可能是各个成员底物识别特异性之所在。 casp