苯及其同系物暴露和多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶关系研析.pdf

中山大学硕士论文 苯及同系物暴露与多聚二磷酸腺苷核糖聚台酶关系的研究 中英摘要 苯及同系物暴露与多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶关系的 研究 公共卫生硕士(衄H) 硕士生：杨爱初 指导教师：刘移民副教授 中文摘要 为进一步探讨苯及同系物对职业暴露人群外周血白细胞聚腺苷二磷酸核糖 本次研究傲了以下工作。 【目的l 1、建立外周血白细胞聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)活性的测定方法， 建立外周血自细胞聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PAP,／)假基因多态及PARP微卫 星DNA之Promoter(CA)多态性的检测方法。 2、探讨苯及同系物接触工人外周血白细胞聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP) 活性。苯及同系物接触者是否存在多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶活性的差异，包括 接触工龄、接触者浓度等差异。另外，苯中毒明显存在女陛易感，多聚二磷酸腺 苷核糖聚合酶是否也存在性别差异。 3、探讨慢性苯中毒病人多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)假基因多态分 布特点，为寻找苯中毒的易感者提供依据。 便下一步研究苯中毒病人与Promoter(CA)多态性的关系，为苯中毒易感性研究 提供依据。 [方法】 l、用[“P]NAD放射性标记法测定某石化企业37名接触苯及同系物的工人外 周血白细胞PARP活性。 2、采用酚一氯仿法提取基因组总DNA，核酸蛋白定量仪(DU400)测定0D260 及0D280的值，计算DNA浓度及纯度。 中山大学硕士论文 苯及同系物暴露与多聚二磷酸腺萤校耩聚合酶关系的研究 中英摘要 3、PARP假基因多态测定，参照Lyn等的方法，并摸索多聚酶链反应(PCR) CCA 条件，从基因组DNA中扩增PARP假基因片段。引物如下：5’．AAGAAG 2．1％琼脂糖电泳。 TCCCCATCTCTTTCT 正链引物：5’一GAT ZZ一3’；负链引物：5’一AAA TTGTGGTAATGACTG CA一3’。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染显色。 [结果] 于对照组10．5％(P0．01)；女性工人PARP活性异常率为61．9％，明显高于男性 工人37．5％fP0．01)。 2、苯中毒病人外周血淋巴细胞微核率范围0‰～6‰，中位数为2‰，对照 组外周血淋巴细胞微核率范围0‰～3‰，中位数为1‰；苯中毒病人SCE率为 (6．31±1．26)次／细胞；对照组SCE率的群体平均值为5．59±0．18次／细胞。苯 中毒组与对照组微核率、SCE率存在统计学差异(PO．05)，苯中毒组和对照组 的PARP假基因中B纂因频率分别为0．121和0．116，苯中毒组与对照组PARP假 基因多态分布一一致(PO．05)。 ％，36．84％。 [讨论] 1、本研究结果可见，苯及同系物接触组外周血白细胞PARP活性和异常率均 明显高于对照组(PO．05)，进一步证实苯及同系物的致毒、致癌作用可能与白细 胞中异常高的PARP活性和DNA损伤有关。考虑到异常高PARP活性对癌变的指示作 用，建议将外周血白细胞PARP活性作为长期低浓度苯及同系物作业人群的健康监 护指标之一，在职业健康体检中与血常规同时进行检测。研究结果表明女性工人 PARP活性异常率高于男性工人，可能与女性对苯的易感性较男性高有关。 2、本次研究证明苯中毒病人中微核率及SCE率的增高，表明苯中毒导致 II 中山大学硕士论文 苯及同系物暴露与多聚=磷酸腺苷核耱聚合酶关系的研究 中莫摘要 DNA的损伤肯定。我们的研究未发现苯中毒与PARP假基因多态性及B基因频 率增高有统计学差异，未发现苯中毒病人PARP酶的假基因多态存在差异。慢性 苯中毒可引起微核率、SCE的增高，未发现PARP假基因多态与慢性苯中毒有关 联