amg-1对小鼠和大鼠缺血脑能量代谢及其神经细胞损伤的影响.pdfVIP

、 ， 》 I， 药 报 ActaPhalm·|Icutlc0Sirfica1q9 AMG—l对小鼠和大鼠缺血脑能量代谢及 神经细胞损伤的影响 刘 岚 冯亦璞 盾 李河水 张均 田 ff{囝医学科学院药物研究所，北京 100050) 提要 本文观察AMG一1时小鼠断头全脑缺血时能量代谢及大鼠大脑中动脉阻断(MCA0) 后行为和病理改变影响。小鼠 SCAMG—Ii～ 10mg／kg30min后，能有效减少脑缺血后-7l 酸 (LA)堆积， 兀’和磷酸肌酸 (PCr)的托竭 SCAMG-I5mg／kg和尼英地平0．5mg／kg，可 减轻大鼠MCA0后的神经症状和i申经细胞缺血性损害。AMG一1的这一改善脑缺血作用与尼 莫地平近似。 关键词 AMG-71；局部脑缺血；脑能 代谢：尼奠地平：神经病理 6一(5一Hydroxy一2一methylpyridylamino)一9一ribofranosylpurine，简称AMG—l， 是从密坏菌菌丝体中提取出的一种新的腺苷类化合物。密环菌是一种与天麻共生的真菌，其 菌丝体已用于临床，代替大嘛治疗头痛、头晕及神经衰弱等症。以往药理实验结果提示： AMG一1可延长小鼠戊巴0=【妥钠睡眠时问和小鼠断头张口呼l吸持续时间¨)，表明AMG一1 可能有中枢抑制作用和脑保护作用：但认为对缺血脑没有延缓神经元死亡的作用 ’。本实验 观察 AMG—l对小鼠脑缺血时的能量代谢以及大鼠MCAO后的行为及组织病理学的影响， 以探讨它对脑的保护作用。 材 料 和 方 法 小鼠及大鼠均由本院动物中心提供。AMG—l由本所合成室提供，尼莫地平系新华制 药，一产品。已糖激酶．葡萄糖 一6一磷酸激酶、磷酸肌酸激酶、乳酸脱氢酶、辅酶 I、辅酶 Ⅱ 及ADP均购 自Sigma公司， 一 ． 脑能量代谢的测定 1．室温条件下脑组织提取：小鼠4S {， 19～ 2lg，随机分为6组，于断头后迅速取 出前脑，分别于 5．10，l5，30干订60S时，准时将组织放人预先称重的含冰冷的0．5ml 0．1mol／LHCl一99％甲醇溶液和2．5m10．3mol／LHCl0 (含lmmol／LEDTA)的离i管 中立即匀浆(polytron10S)，离心管前后两次重量 值为脑重。其余提取步骤与以前方法相 同。样品贮于 一20℃，待测定。非缺缸l0S)组则在液氮温度下进行提取。按 Lowry法， 测定提取液中LA，ATP及PCr的含最 给药方式：小鼠48只，竺，l8～ 25g，随机 分为 6组，分别St：八MG—l0．1，l，5． P*ig．g及溶剂对照，30min后断头取前脑，用 断头后 15S作为全脑缺血指标。各组待断头后l5S时准时匀浆。提取及测定方法同前。 二 ．近端大脑 中动脉阻断术 Wister大鼠，S ，300～380g。ip．Ketamine120mg／kg麻醉。手术依 Tamura等 ’ 方法，于大鼠左侧外耳与眼之间中点切开皮肤，逐层分离肌肉，咬骨钳咬去颧骨，暴露前颞 本文干 1991年 1月 lO月收到。 gg2 药 ’’报 ，＼ctaPharmaceuticaSinica{091．26(121：881～ 885 窝，j卯 孔浦2～3IT1111．外例 l～1．5mm 处钻取 ·、颅窝，可见一条较直的血管，即为 夫脯 l【|动脉(MCA1，细针挑起 MCA。电凝烧灼 以薄膜，502胶水封闭颅窗，刨面滴 penicillinG，逐层缝合，回笼观察。假手术组除不烧灼 MCA外，余过程均同MCAO 组。 三 ．行为指标 MCAO动物待麻醉清醒后，参照 Bedcrson等 ’的方法，动态观察行为的变化，并定级 打分 标准如下：1．提尾观察有右肩内旋．右前肢内收者4分。2．将大鼠置于光滑平面，推 其左肩令其向右旋转运动，阻力降低者 l～ 3分 3．右侧肢体肌张力降低，l～ 3分。满 分共计 l0分。 大鼠67只，随机分组，分别于MCAO后2，24，48，72h，d7和 l4，依上述标准，动态观 察并记录不 同时间的行为改变。给药