fgf21基因优化及生物活性的研究.pdfVIP

药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2012, 47 (7): 897−903 ·897 · FGF21 基因优化及其生物活性研究 * 叶贤龙, 高华山, 王文飞, 任桂萍, 刘明瑶, 何 昆, 张雅坤, 赵景壮, 于 丹, 李德山 (东北农业大学生命科学学院, 黑龙江 哈尔滨 150030) 摘要: 成纤维细胞生长因子 21 (FGF21) 是 FGF 家族的一员, 它具有独立、安全以及有效地调节生物体内血 糖水平的能力。为了提高 FGF21 蛋白的活性, 将人 FGF21 (hFGF21) 与鼠 FGF21 (mFGF21) 的功能区互换, 构 建了一种新的 FGF21 基因 (命名为 hmFGF21) 。通过基因重组的方法构建 SUMO-hmFGF21 表达载体后, 转化大 肠杆菌 Rosetta 中诱导表达。对融合蛋白进行纯化和酶切, 获得的 hmFGF21 突变体纯度在 95% 以上, 并在细胞 水平和动物水平上检测了突变体的生物学活性。结果表明, 与野生型 hFGF21 相比, 相同菌量 hmFGF21 可溶性 蛋白表达量提高了约 2 倍。人肝细胞模型 HepG2 的糖吸收实验显示, hmFGF21 的葡萄糖吸收显著优于野生型 hFGF21 。2 型糖尿病动物速效降糖实验和长效降糖实验表明, hmFGF21 的降糖效果显著优于野生型hFGF21 。这 些结果说明, 野生型 hFGF21 经优化改造后显著提高了其生物学活性。 关键词: FGF21; 葡萄糖吸收; 2 型糖尿病 中图分类号: R963 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (2012) 07-0897-07 Optimization and characterization of a novel FGF21 mutant YE Xian-long, GAO Hua-shan, WANG Wen-fei, REN Gui-ping, LIU Ming-yao, HE Kun, * ZHANG Ya-kun, ZHAO Jing-zhuang, YU Dan, LI De-shan (College of Life Science, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China) Abstract : Fibroblast growth factor 21 (FGF21) is a member of FGF family. It has been demonstrated that FGF21 is an independent, safe and effective regulator of blood glucose levels in vivo. In order to improve the activity of FGF21, we exchanged the β10−β12 domain of the human FGF