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复旦大学博士研究生论文2008
摘 要
鞘磷脂合酶是催化鞘磷脂生物合成的最后一步的关键酶，它以神经酰胺和卵
磷脂为底物，催化形成鞘磷脂和甘油二酯。鞘磷脂合酶在人体有两种异构体，分
mRNA水平及蛋白水平
的去垢剂不溶性膜成分。流式细胞检测，细胞caspase．3
检测结果表明，TNF
细胞内鞘磷脂、神经酰胺、甘油二酯的含量以及神经酰胺：鞘磷脂比率均显著性
升高，而卵磷脂含量无明显改变。我们继续用si砌叮A干扰THP．1来源的巨噬细
胞(TDMC)，SMSl或SMS2
活性，并抑制LPS诱导的TDMC细胞凋亡。脂类测定表明，TDMC分别经各种
siRRA
siRNA处理和LPS刺激后，与对照组细胞相比，SMSlsiRNA或SMS2
干扰的TDMC细胞内SM和DAG都显著性下降，而卵磷脂和神经酰胺的含量以
及神经酰胺：鞘磷脂比率均无显著性改变。Lysenin细胞毒实验表明，SMS干扰
后的TDMC细胞膜鞘磷脂含量下降。而用免疫荧光流式细胞技术测定表明，SMS
表明，在CHO细胞中，SMS的高表达，可能通过神经酰胺的含量增高促进TNF
a诱导的细胞凋亡，但不排除DAG升高激活新型PKC介导信号传导的可能。
合体的形成抑制了LPS诱导的细胞凋亡，也可能通过DAG介导信号传导影响细
胞凋亡。SMS异常表达与细胞凋亡的深入机制需要进一步研究。
关键词：鞘磷脂合酶细胞凋亡基因高表达基因敲减
复旦大学博士研究生论文2008
ABSTRACT
last inthe
Sphingomyelinsynthase(SMS)，thekeyenzyme
and
ceramide substratesto
biosyntheticpathway,uses phosphatidy’lcholine(PC)as
SMand evaluatetheroleofSMSin
produce diacylglycerol(DAG)．To apoptosis，we
constructedChinesehamster that humanSMS1 or
ovary(CHO)cellsstably
express
SMS2．WefoundthatSMS1 orSMS2 resultsina increase
overexpressionsignificant
incellularlevelsof DAG
SM(24％or
20％)，ceramidem％or42％)，and 05％or
3 ceramide：SM8％or1 with
1％)，嬲well鹳the ratio(1
controls．Cells SMS1 orSMS2weremore to
overexpressing likely
undergolysis
mediated thatcauses its
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