第八蛋白分选与膜泡运输.ppt

分泌性蛋白N端序列为信号肽，指导分泌蛋白到内质网上合成，在蛋白合成结束之前信号肽被切除。信号识别颗粒和内质网膜上的信号识别颗粒的受体（停泊蛋白）等因子协助完成这一过程。 （二）信号肽与共翻译 ? 肽链边合成边转移至内质网腔中的方式称为共转移。 ? 跨膜蛋白的起始转移序列和终止转移序列 起始转移序列：蛋白质氨基末端的信号序列除作为信号被SRP识别外，还具有起始穿膜转移的作用。 停止转移序列：肽链中还有某些序列与内质网膜具有很强的亲合力而结合在脂双层之中，能阻止肽链继续进入内质网腔，使其成为跨膜蛋白质，称为停止转移序列。 内部信号序列： ? 跨膜蛋白的类型及其取向 ?起始转移序列和终止转移序列的数目决定多肽跨膜次数 （一）网格/笼形蛋白衣被小泡 运输途径：质膜→内体；高尔基体→内体；高尔基体→溶酶体、植物液泡。 网格结构：3重链、3轻链，形如triskelion，clathrin 的曲臂交织在一起，形成5边形网孔的笼子 衔接蛋白：连接包被与受体。 Clathrin coated vesicles Selective transport by clathrin coated vesicles 当衣被小泡形成时，可溶性蛋白dynamin聚集成一圈围绕在芽的柄部，使柄部的膜尽可能地拉近（小于1.5nm），导致膜融合，pinch off衣被小泡。 （二）COP I衣被小泡 功能：回收、转运内质网逃逸蛋白（escaped proteins）返回内质网；也可介导高尔基体不同区域间的蛋白质运输。 组成：由7种蛋白组成。 回收信号：Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL）。 COP I Vesicles Cop I and II Vesicles Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL） （三）COPⅡ衣被小泡 介导内质网到高尔基体的物质运输。形成于内质网出口位点，该处无核糖体。 主要亚基：Sar1GTP、Sec23/Sec24、Sec13/Sec31。 多数跨膜蛋白直接与COP II结合，少数跨膜蛋白和多数可溶性蛋白通过受体与COP II结合。 分选信号：位于跨膜蛋白胞质面，形式多样，常包含双酸性基序[DE]X[DE] ，如Asp-X-Glu。 COP II Vesicles COPII Coated vesicle 二、衣被形成 衣被召集GTP酶：为G蛋白，活化状态可引起衣被蛋白聚集，包括ARF和SAR 1。存在于细胞质，激活后转位到膜上。 ARF：参与clathrin和COP I衣被的形成。 SAR 1：参与COP II衣被的形成。 ER上形成COPII小泡时，SAR1交换GDP/GTP而激活。 激活的SAR1暴露出脂肪酸链尾巴，插入ER膜，促进衣被蛋白的核化和组装。 SAR1可激活磷脂酶D，将一些磷脂水解，使衣被蛋白牢固地结合在膜上。 当小泡从膜上释放后，衣被很快就解体。 Coat assembly 三、膜泡运输的定向机制 （一）SNAREs 功能：介导运输小泡与靶膜的融合。 类型：v-SNAREs和t-SNAREs。 结构：具有一个螺旋结构域，相互缠绕形成跨SNAREs复合体，将小泡与靶膜拉在一起。 SNAREs SNAREs in vesicle transport 神经细胞中，SNAREs负责突触小泡的停泊和融合。破伤风毒素和肉毒素能选择性地降解SNAREs，阻断神经传导。 病毒融合蛋白的工作原理与SNAREs相似，介导病毒与宿主质膜的融合。 HIV fusion protein （二）Rabs 也叫targeting GTPase，属于G蛋白，起分子开关作用。已知30余种，不同膜上具有不同的Rabs。 Rabs促进和调节运输小泡的停泊和融合。 Rabs还有许多效应因子，帮助运输小泡聚集和靠近靶膜，触发SNAREs抑制因子。 Rabs in docking 复习思考题 1. 名词解释： 信号肽；共翻译转运；后翻译转运 2. 什么是分泌性蛋白合成的信号肽学说？涉及哪些组分？各组分间是如何协同的？ 3. 蛋白分选转运的方式有哪几类？ 4. 转运膜泡在细胞内运输的轨道有哪些？与之相关的马达蛋白有哪些？ 5. 包被蛋白主要有哪几种？其主要作用是什么？ 6. 三种包被小泡各自介导哪些运输方向？ 7. SNAREs 主要功能是什么？主要有哪几种类型？ 在游离核糖体上起始合成 SRP结合信号肽后暂停翻译 SRP与RER上的DP结合 信号肽与移位子结合，打开孔道 SRP脱离，肽链合成重启 信号肽被切除、降解 肽链合成终止，核糖体释放，肽链折叠 （一）蛋白向RER跨膜转运 * * * * * * * * * * * 蛋白质分选与膜泡运输P