第三章病毒和亚病毒因子重点分析.pptVIP

第一节 病毒 病毒的主要类群 3、一步生长曲线 概念： 或称一级生长曲线，是定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。 基本实验步骤 1、吸附 用噬菌体的高倍稀释液去感染高浓度的宿主细胞，以保证每个细胞所吸附的噬体体至多只有一个。 吸附数分钟后，在混合液中加入适量的相应抗血清以中和尚未吸附的噬菌体。 2、稀释 用保温的培养液稀释此混合液，同时终止抗血清的作用。 3、培养与测定 置于适宜的温度与培养，其间每隔数分钟取样，连续测定其效价，以感染时间为横坐标，噬菌体的效价为纵坐标绘制一步生长曲线。 补充1：病毒的分类 病毒的分类系统 病毒分类与命名的权威机构 国际病毒分类委员会（ICTV） 国际病毒分类系统 目、科、亚科、属、种 补充2：病毒研究的基本方法 一、病毒的培养 病毒只能在对其敏感的相应宿主及其细胞内才能繁殖。 二、病毒的分离与纯化 1、病毒的分离 将疑有病毒而待分离的标本经处理后，接种于敏感的实验宿主、鸡胚或细胞培养，经过一段时间后，检查病毒特异性病理表现或用其他方法来肯定病毒的存在。 2、病毒的纯化 (1)病毒纯化的标准 补充2：病毒研究的基本方法 二、病毒的鉴定：病毒性质和特征分析 1、病毒感染的宿主范围及感染表现的鉴定 补充3：病毒与肿瘤发生 肿瘤 是由失去调控而异常生长和繁殖的新生异常细胞或瘤形成的组织团块。 据估计，15%的人类肿瘤是由病毒所引起。 肿瘤病毒 可引发机体肿瘤发生的病毒。其最显著的特征是能够像温和噬菌体一样把病毒自身核酸整合到宿主染色体DNA上。 补充4：新生病毒 概念 指以往局部低水平感染的病毒或具有种间屏障的病毒，将其宿主范围扩大到别的物种，引起了大范围的人类传染性疾病。 其产生与人类对环境的破坏有关、 艾滋病（人类获得性免疫缺陷综合症，AIDS），其病原体是人免疫缺陷病毒（HIV） 其产生与现代交通、旅游发展和人类大规模迁居有关 脊髓灰质炎病毒 其产生与某些病毒基因突变改变了宿主范围或致病力有关 禽流感（AI），由A型流感（H有15个型，N有9个型）病毒引起 H5N1流感、甲型H1N1流感 ，由A型流感病毒变种引起 其产生与人和动物的密切接触有关 严重急性呼吸综合症（SARS），由SARS冠状病毒引起 E.coil的?噬菌体 一种温和噬菌体 头呈二十面体（55nm），有一可弯曲、中空、非收缩性长尾（B型），头、尾间由“颈”连接。 核心为线状dsDNA，其两端各有一由12个碱基组成的粘性末端“cos”位点。基因组中约一半为“必要基因”，另一半则为“非必要基因”，为良好的基因工程载体。 ①遗传背景清楚；②载有外源基因时，仍可与宿主的核染色体整合并同步复制；③宿主范围狭窄，使用安全；④由于其两端各具“cos”位点，故可组成科斯质粒（粘性质粒或粘粒）；⑤感染率极高（近100%），比一般质粒载体的转化率高出千倍。 1、噬菌体的繁殖 吸附(adsorption) 侵入 (penetration) 增殖(复制与生物合成） 成熟（装配）( assembly ) 裂解（释放）( release) 几个概念 烈性噬菌体（virulent phage） ——感染细胞后，能在寄主细胞内短时间完成吸附、侵入、增殖、成熟和裂解5个阶段而实现繁殖，产生大量子代噬菌体并引起细菌裂解的噬菌体。 温和噬菌体（temperate phrage） ——噬菌体感染细胞后，将其核酸整合（插入）到宿主的核DNA上，并且可以随宿主DNA的复制而进行同步复制，在一般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。 裂解性周期（增殖性周期） ——烈性噬菌体所经历的繁殖过程 The Lytic Life Cycle of Lytic Bacteriophages 吸附： 接触→结合→特异性吸附（病毒以其特殊结构与宿主细胞表面的特异受体结合） 噬菌体:尾丝、刺突--------- 细胞壁(脂多糖、脂蛋白、磷壁酸) 荚膜、鞭毛、性毛 动物病毒：刺突、吞噬作用和胞饮作用被动进入 植物病毒：刺突 侵入 病毒或其一部分进入宿主细胞的过程 噬菌体:吸附后尾丝收缩，使尾管碰及细胞壁，这时，尾管端所携带的少量溶菌酶水解细胞上的肽聚糖，然后，尾鞘收缩，把尾管推出并插入细胞壁中，头部的核酸就通过尾管迅速注入宿主细胞中，而将蛋白质外壳留在壁外。 动物病毒：核衣壳侵入，需脱壳 植物病毒：通过表面伤口或昆虫口器插入细胞而侵入 吸附和侵入 The bacteriophage binds to receptors on the bacterial cell wall. The bacteriophage injects its genome into the bacteriums cytoplasm Fig.