第十章核酸的生物合成要点.doc

第十章 核酸的生物合成 第一节 遗传信息的贮存和流动 p438 遗传信息的贮存和流动遵循中心法则： 由中心法则可见，通过DNA的复制，遗传信息即得到了拷贝和贮存； 遗传信息的传递方向是DNA →RNA → 蛋白质（绝大多数生物） 。 1、 DNA复制：以原来的DNA分子为模 板，合成一个与原来完全相同的DNA的过程。 2、转录：以DNA为模板，合成一条与DNA碱基互补的RNA的过程。 3、翻译（转译）：按照RNA上所携带的遗传信息，合成一条具有特定AA顺序的多肽链的过程。 此外，在RNA病毒中，还发现了逆转录和RNA复制现象。 4、逆转录：见于某些RNA病毒。在逆转录酶的作用下，以RNA为模板， 合成一条与RNA互补的DNA的过程。 P491 5、RNA复制：见于某些RNA病毒。以RNA为模板，合成一条与原来RNA 互补的RNA的过程。 P495 即在某些生物中，RNA也可以是遗传信息的载体。 第二节 DNA的复制 2.1、 DNA复制的一般规律 1、 DNA的半保留复制 p441 由Watson和Crick与1953年提出，并由Meselson和Stahl在1958年用同位素标记进行了证明。 DNA的半保留复制：DNA复制时，两条链先解旋分开，然后每条链均可作 为模板在其上合成新的互补链，这样新形成的两个DNA分子的碱基顺序与原来的DNA分子完全一样。但每个子代DNA分子中，一条链来自亲代DNA ，另一条链则是新合成的。 2、 DNA复制的起点和方向 p441-442 ⑴、复制的起点 复制起始点（oriC，复制原点）：开始复制的DNA分子的特定部位。该处DNA序列常含多个重复序列结构。 原核生物：只有一个复制起始点。真核生物：有多个复制起始点。 复制开始时， DNA双链解开，复制起始点呈叉子形，称为复制叉。以后随复制叉的向前移动，链得以不断延长（即DNA不断合成）。 ⑵、 复制的方向 大多为双向等速（对称）复制：复制从固定的起点开始，以双向等速的方 式进行。见于大多数生物DNA。 还有双向不对称复制：复制虽从定点开始，但两个复制叉的移动不对称。 单向复制：复制时只由一个复制叉向一个方向进行复制。 3、 DNA的半不连续复制 p442-443 冈崎发现， DNA复制时，在复制叉上一条新链是连续合成的，称前导链， 合成方向5’→3’，与复制叉的前进方向一致，模板链为3’→ 5’；另一条新链的合成则不连续，称滞后链，合成方向也是5’→ 3’，但与复制叉的前进方向相反，模板链为5’→ 3’。这种机制称为DNA的半不连续复制。 滞后链合成时，先合成许多不连续的DNA片断，大小约1000～2000个碱基（原核；真核为100～200个碱基），称冈崎片断，然后再将这些片断连接成一条完整的DNA链。 2.2、与DNA复制有关的酶 DNA的复制是在DNA聚合酶等多种酶和蛋白因子的作用下进行的。 1、 DNA聚合酶 p443-445 催化DNA分子聚合（合成）的酶。由Komberg于1956年首先从大肠杆菌中提 取得到。 ⑴、反应条件 模板：单链DNA，带缺口的双链DNA。 底物：四种dNTP。 引物：带游离3’-OH的小片段RNA或DNA （可与模板DNA配对）。 DNA聚合酶只能在引物上延伸DNA链，不能从无到有合成DNA 。 激活剂：Mg2+。 ⑵、反应过程 p444 聚合酶对碱基具选择性，底物只能按照碱基互补配对的原则（A-T ，G-C）掺入DNA链。这是DNA复制忠实性的保证之一。 ⑶、合成的方向（链延伸方向）：5’ → 3’。 ⑷ 、总反应式： ⑸、DNA聚合酶的外切酶活力： 催化末端磷酸二酯键的水解。 绝大多数DNA聚合酶均具有3’→5’的外切酶活力，该活力具有校对功能。可用以切除聚合反应中错配的碱基。该活力只作用于单链DNA，对双链DNA则不起作用。 DNA聚合酶3’→5’的外切酶活力是DNA复制忠实性的又一保证。 此外，体内多种DNA修复系统也是DNA复制忠实性的保证之一。 ⑹、大肠杆菌的DNA聚合酶 p445-446 共有五种，分别称为DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ。 ①、DNA聚合酶Ⅰ（Kornberg酶）：单链多肽。 具5’→3’的聚合酶活力（模板为带 缺口的双链DNA ，活力低）、3’→5’的外切酶活力和5’→3’的外切酶活力的多功能酶。 其中5’→3’的外切酶活力只作用于DNA双链，用于切除冈崎片段中的RNA引物及参与DNA损伤后的修复。 该酶由于聚合活力低，不是大肠 杆菌的DNA复制酶，而只是在DNA复制、重组和修复中起修缮工的作用。 ②、DNA聚合酶Ⅱ：多亚基酶。 具5’→3’的聚合酶活力（模板为带 缺口的双链DNA，活力比聚合酶Ⅰ高。），3’→5’的外切酶活力，无5