雌激素对大鼠急性缺血后肢血管新生影响的研析.docVIP

中英文对照表　 中文全称　　　　　　　　　　　　　　　　英文全称及缩写　 　  血管内皮生长因子　　　　　 　　　　磷酸盐缓冲液　　　　　　　　　  vascular endothelial growth factor（VEGF） 　　　 Phosphate Buffer Saline（PBS）　　　　  　　　　定量酶联免疫吸附实验　　　　enzyme- linked immunosorbent assay（ELISA） 动脉硬化性闭塞症　　　　　　　　atherosclerosis obliterans（ASO）　　　　　　　　  血栓闭塞性脉管炎　　　　　  thromboangiitis obliterans（TAO）  雌二醇　　　　　　　　　　　　　　　　　　estradiol（E2）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 雌激素受体　　　　　　　　　　　　　　estrogen receptor（ER）　　　　  雌激素　　　　　　　　　　　　　　　  estrogen（E）　  动脉粥样硬化　　　　　　　　　　　　atherosclerosis（AS）　  微血管密度　　　　　　　　　　　 孕激素　　　　　　　　　　　　　　　  microvascular density（MVD） progestin（P）  　 　 　 　 题目：雌激素对大鼠急性缺血后肢血管新生影响的研究　 作者：李泽宇　 导师：何延政　教授　 学位：硕士　 学校：泸州医学院　 　 摘　　要　 目的：研究雌激素在肢体缺血代偿过程中，对 VEGF 表达及骨骼肌微血管 密度（MVD）的影响，探讨雌激素影响缺血肢体病理生理变化的作用机制。方 法：SD 雄性大鼠 １２０ 只，随机选 ２４ 只大鼠作为对照组，其余 ９６ 只大鼠随机 分为两实验组，每组 ４８ 只，一组为后肢缺血组（简称 I 组），行右后肢单侧股 动脉结扎切除术；另一组为后肢缺血＋雌激素组（简称 I+E 组），手术方式与 I 组相同，并于手术当天开始皮下注射 １７β－雌二醇（30μg/kgd）至实验结束。各 组分别于术后 １ 天、３ 天、７ 天、１４ 天、２８ 天及 ５６ 天取材，每次 ８ 只大鼠，获 取大鼠右后肢骨骼肌固定及石蜡包埋，免疫组织化学染色检测骨骼肌 VEGF 蛋 白表达及 CD３４ 表达，同时抽血 ELISA 法测定血清 VEGF 数值。对照组大鼠仅 作右后肢皮肤切开和缝合，与实验组动物在同一时相点取材，每次 ４ 只大鼠。 结果：1. 免疫组化染色骨骼肌 VEGF 蛋白表达检测结果：对照组大鼠各时相点 骨骼肌 VEGF 蛋白表达呈阴性或极弱阳性。两实验组第一天骨骼肌内未发现 VEGF 阳性表达，阳性系数为 ０；第三天均发现 VEGF 蛋白阳性表达，其表达 强度在第 ７ 天达到高峰（I 组：３．２５±０．４６；I+E 组：３．７５±０．６４），以后呈下 降趋势，在 ５６ 天明显减弱（I 组：０．８８±０．６４；I+E 组：１．７５±０．７１）。I+E 组 VEGF 蛋白表达较高，与 I 组比较在各时相点（第 １ 天除外）均有显著增高 （Ｐ０．０５）。２．　血清 VEGF 检测结果：对照组大鼠各时相点血清 VEGF 数值波 动不大（５７．５８±２．７８pg/ml）。两实验组第一天大鼠血清 VEGF 数值即升高（I 组：６３．６３±５．４５ pg/ml；I+E 组：７４．５±５．３７pg/ml），其中 I+E 组与对照组比 1 较有显著差异（Ｐ０．０１）；于 ７ 天达到高峰（I 组：１３９．１３±５．２２ pg/ml；I+E 组：１５９．７５±４．３３pg/ml），以后缓慢回落。I+E 组与 I 组比较，在各时相点血清 VEGF 数值均显著升高（Ｐ０．０１）。３．　骨骼肌微血管密度（MVD）检测结果： 以 CD34 染色阳性的血管数作为骨骼肌微血管密度（MVD）。对照组大鼠各时 相点骨骼肌 MVD 变化不大（１４．５８±１．９９）。两实验组第一天骨骼肌 MVD 明显 降低（I 组：９．７５±２．０５；I+E 组：１１．８８±２．１７），与对照组比较有显著差异 （Ｐ０．０５）；以后 MVD 持续增高，在 １４ 天达峰值（I 组：３０．２５±１．９８；I+E 组：４０．５０±２．２０），然后逐渐下降，但仍维持在一定水平。在各时相点（第 １ 天除外），I+E 组 MVD 均较 I 组显著升高（Ｐ０．０５）。４．　VEGF 表达与 MVD 之间的关系：直线相关分析结果表明，I 组和 I+E 组内两种 VEGF 表达结果与 相应组 MVD 之间均具有显著相关性（P0.01）。结论： 1. 肢体缺血后 VEGF 表达增强，于 7 天达高峰，但其表达有一定