CH蛋白质生物合成改.pptVIP

许多蛋白刚由核糖体合成时往往没有活性，还需要有一个合成后加工过程。 蛋白质一级结构的加工修饰 N-端氨基酸切除：脱去N-末端的甲酰基或少数几个AA； 氨基酸修饰：羟基化、糖基化、磷酸化、甲酰化； 肽段切除：进行专一性切割，激活形成有活性的酶或蛋白质等； 二硫键形成。 蛋白质的合成后加工 蛋白质高级结构的形成 构象的形成 蛋白质中AA的排列顺序。 蛋白质所外的环境条件。 助折叠蛋白：酶；分子伴侣 亚基的聚合 辅基的连接 蛋白质的合成后加工 胰岛素蛋白的合成后加工 蛋白质的合成后加工（例子） 有不少抗生素可以专一性地抑制蛋白质的合成，使细胞的正常生命活动不得延续。 由于线粒体蛋白质合成与原核细胞相似，因此能够抑制原核细胞蛋白质合成的抗生素对真核细胞的线粒体蛋白质合成也有一定的影响，如氯霉素对人体的副作用。 常见抗生素对蛋白质合成的抑制作用见下表。 蛋白质合成的抑制剂 某些抗生素对原核生物蛋白质合成的抑制作用 抗生素 作用点 作用原理 四环素族（金霉素、四环素、土霉素） 核糖体小亚基）（30S、40S） 阻碍氨酰-tRNA与核糖体结合，易透入原核细胞、不易透入真核细胞 链霉素、新霉素、卡那霉素 30S小亚基 抑制起始作用、造成误译 氯霉素、林可霉素、红霉素 50S亚基 抑制转肽酶，阻止肽键形成 寡聚霉素 氨酰基部位 使肽链合成提前结束 蛋白质合成的抑制剂 在蛋白质的合成过程中，细胞必须保证新合成的蛋白质被运送到相应的部位发挥作用，这个过程称为蛋白质定位。不同部位的蛋白质以不同的方式进行合成及运输。 在胞质溶胶中发挥作用的蛋白质如糖酵解过程中需要的酶，必须被定位于溶胶中，这些酶或蛋白质是由游离的核糖体进行合成，并被直接释放到溶胶中。 线粒体、溶酶体、质膜、细胞核形成中所需要蛋白质的合成则一般是在粗面内质网上合成，合成后通过特定信号序列的作用被导向到不同的功能部位。 多肽合成后的定向运输 分泌蛋白质的合成及运输 分泌蛋白质是由粗面内质网上的核糖体合成的，分泌蛋白质的氨基端都有一段由13-35个疏水性氨基酸构成的信号序列（信号肽）。在信号序列、信号识别颗粒蛋白（SRP：siganl recongnition particle）、SRP受体蛋白等的联合作用下，分泌蛋白质进入内质网腔，折叠成最终的构象，内质网通过出芽，形成囊泡，将蛋白质运输到高尔基体，在此糖基化，再通过出芽，及质膜的胞吐作用将其释放到细胞外。 信号假说（示意粗糙内质网上蛋白质合成过程） 分泌蛋白质进入内质网腔 信号识别蛋白与信号肽的结合可防止分泌蛋白被导入内质网前过度合成，以方便蛋白质在内质网内的运输。 分泌蛋白质的合成与胞吐 质膜蛋白质的合成后运输 质膜蛋白质的合成也是由粗糙内质网上的核糖体进行合成，只是它没有分泌到内质网腔中，而是直接被锚定在内质网膜上，通过出芽方式运输到高尔基体，高尔基体再通过出芽方式被运送到质膜上。 膜蛋白质合成运输示意图 膜蛋白质插入内质网膜示意图 溶酶体蛋白质合成及运输 溶酶体蛋白质也是在粗糙内质网上合成，通过出芽方式运输到高尔基体的正面区室（cis），并在这里被加上甘露糖-6-磷酸（糖基化），甘露糖-6-磷酸是将溶酶体蛋白质引导到溶酶体的信号，它与高尔基体反面区室(trans)的甘露糖-6-磷酸受体识别、结合、出芽、形成分选小泡，在分选小泡内，蛋白质与甘露糖-6-磷酸受体分离，甘露糖-6-磷酸在磷酸酶的催化下水解除去，分选小泡中的溶酶体蛋白质再通过出芽方式被运送到溶酶体内。 溶酶体蛋白质合成与运输示意图 线粒体、叶绿体蛋白质合成与运输 线粒体、叶绿体中许多蛋白质的合成是由核基因编码的，这些蛋白质在胞质溶胶中合成后，被运输到相应的细胞器中。 在胞质溶胶中合成的蛋白质N-端都有一段由15-35个富含丝氨酸、苏氨酸及带正电荷氨基酸构成的基质导向序列，这段序列可以与伴侣蛋白质（hsp70）结合，阻止蛋白质在胞质中折叠影响其向线粒体、叶绿体中的运输，并以这种形式在受体蛋白质的帮助下，运输到线粒体、叶绿体内，随后伴侣蛋白质与其分离，基质导向序列被切除。 线粒体、叶绿体蛋白质合成及运输示意图 核蛋白质的合成与运输 核蛋白质也是在胞质溶胶中合成后，在核定位序列（信号）的引导下进入细胞核的，核定位序列的长度一般为4-8个氨基酸构成，富含带正电荷的Lys、Arg，并通常含有Pro，而且蛋白质进入细胞核的过程还需要消耗ATP。 不同部位蛋白质的合成及运输过程示意图 不同蛋白质的合成及运输（详见细胞生物学） 1961 Nirenberg 和 Matthaei 用人工合成的 poly U, 体外合成多肽破译了UUU-------编码 Phe 每组都有20种 AA—tRNA，但只有一种AA用14C标记 此方法未能破译全部的