烟草中三种农药的测定方法(修改稿).docVIP

权利要求书 1、一种烟草及烟草制品中三种酰胺类除草剂的高效液相色谱-串联质谱的测定方法，即甲草胺、异丙甲草胺和敌草胺三种除草剂，其特征在于：该方法是通过基质分散固相萃取法萃取除草剂农药残留，以液相色谱-串联质谱直接测定烟草及烟草制品中的农药残留量，具体方法如下： a、样品的提取：准确称取2 g样品（精确至0.01 g）于50 mL具盖离心管中，加入10 mL水，振荡直至样品被水充分浸润；静置10 min后移取10 mL乙腈和50 ?L内标（氯唑磷，20 ?g/mL）至离心管中，然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上，以2000 rpm 速率振荡1 min。将离心管置于0 ℃条件下保持10 min，然后向离心管中加入Agilent SampliQ QuEChERS EN萃取试剂盒，立即于漩涡混合振荡仪上，以2000 rpm速率振荡2 min，然后以4000 rpm速率离心10 min； b、样品净化：移取上清液1.0 mL于1.5 mL离心管中，加入Agilent QuEChERS 2 mL 分散固相萃取试剂盒，于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm速率振荡2 min，以6000 rpm 速率离心2 min；吸取上清液经0.22 ?m有机相滤膜过滤，移取200 ?L，用乙腈稀释至1.0 mL，用LC-MS/MS检测； c、内标溶液的配制：用氯唑磷做内标，配制氯唑磷浓度约为20 ?g/mL的甲醇溶液； d、基质混合标准工作溶液制备：配制具有浓度梯度的且含有内标的基质混合标准工作溶液； e、液相色谱-串联质谱测定:吸取以上配制好的不同浓度的基质混合标准工作溶液，注入液相色谱-串联质谱仪； f、农药残留量测定结果的计算 以内标法进行残留量的定量分析，即以农药和内标的定量离子对峰面积比对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于0.999,对提取后的样品进行测定，测得检出农药和内标的定量离子对峰面积比，代入标准曲线，求得样品中的各种农药的残留量。 2、根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：标准工作溶液制备具体如下：分别称取10 mg三种农药标准品于10 mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，配制成每种农药的单一标准储备液；移取一定量各农药的单一标准储备液于100 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度配得混合标准储备液；分别移取混合标准储备液25 ?L, 50 ?L, 100??L, 250 ?L , 500 ?L 及1000 ?L到6个10 mL容量瓶中，并加入50 ?L内标（氯唑磷，20 ?g/mL）?用乙腈定容，制得标准工作溶液；然后分别移取上述标准工作溶液200 ?L与200 ?L的空白样品提取溶液混合，并用乙腈稀释至1.0 mL，配制成基质混合标准工作溶液。 3、根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于：标准工作溶液制备具体如下：采用的液相色谱条件为：色谱柱：Atiantis dC18 (150 mm×2.1 mm，3 ?m, 美国Waters公司)；流动相：乙腈-水（0.1 %甲酸)，梯度洗脱；流速：0.2 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：10 ?L；采用的质谱条件：扫描方式：正离子扫描; 电喷雾离子源(ESI); 雾化气流量为60 psi; 气帘气流量18 psi; 辅助加热气流量为60 psi; 离子化温度500 ℃; 碰撞气流量为10 psi; 4种气体均为氮气; 停留时间为100 msec; 电离电压5500 V, MRM模式采集。 说 明 书 摘 要 本发明涉及一种烟草及烟草制品中三种酰胺类除草剂的高效液相色谱-串联质谱的测定方法，即甲草胺、异丙甲草胺和敌草胺三种除草剂，属于烟草及烟草制品中农药残留的理化检验技术领域，其特征在于：该方法是通过基质分散固相萃取法萃取农药残留，以液相色谱-串联质谱直接测定烟草及烟草制品中农药残留量的方法。本发明的方法克服了现有技术样品处理方法的不足，针对烟草样品优化了样品前处理方法和仪器检测条件，与现有技术相比本发明方法具有如下优良效果：本发明方法样品前处理过程简单、快速，可减少烟草中色素等杂质的干扰,并具有操作准确、灵敏度高及重复性好的优点。 说明书 烟草及烟草制品中三种酰胺类除草剂的高效液相色谱-串联质谱的测定方法 技术领域 本发明属于烟草及烟草制品中农药残留的理化检验技术领域，主要涉及烟草及烟草制品中酰胺类除草剂残留量的测定技术，具体说是用乙腈对样品进行浸提，再加入无水硫酸镁与氯化钠等振荡促使其分层，随后进行分散固相萃取，以液相色谱-串联质谱直接测定烟草及烟草制品中三种酰胺类除草剂残留量的方法。 背景技术 酰胺类除草剂是 20世纪 60年代开发的一类高效、高选择性的触杀型除草剂。它对多种禾本科双子叶植物具有强烈的杀毒作用, 主要用于防除一年生禾本科杂草幼芽。大