生化分析技术四离心.ppt.docxVIP

第四节 离心技术 Centrifugal technique 一、离心技术发展历程及其工作原理 二、离心机的种类 三、离心机和转头的维护 四、离心机的事故 五、离心技术在样品制备中的作用 目录 一、离心技术发展历程及其工作原理 19世纪　手摇离心机　收集蜂蜜等 1.离心机发展历史 一、离心技术发展历程及其工作原理 1923年  瑞典化学家　Svedberg 第一台具有光学系统的分析超速离心机，最高转速达45,000 rpm。 1926年　Svedberg　测定马血红蛋白分子量，首次证明蛋白质为均一的生物大分子。 1951年　Brakke MK 在差速离心的基础上发展了速率区带离心法。 1955年　Anderson N G发明了区带转头，并用区带离心法首次证明DNA双螺旋结构半保留复制的假说。 20世纪60年代后 离心机制造工艺； 区带转头； 高强度的钛合金的应用； 半导体集成电路； 计算机技术的发展； 高频调速电机的使用。 1.离心机发展历史 一、离心技术发展历程及其工作原理 20世纪90年代中期 碳素转头（超强超轻材料合成）， 抗拉强度比钛合金强。 2、基本原理与概念 R2+D2=(r+l)2 2、基本原理与概念 ω 线速度V：物体运动的速率；角速度ω：物体在单位时间内转过的角度。 r 物理运动360度的路程为：2πr 周期T：运动一周所需的时间，T=2πr/V ω=2π / T =V / r 1.线速度V=s/t=2πr/T 2.角速度ω=Φ/t=2π/T=2πf V = ω×r ω (1)、离心技术（Centrifuge Technique）: 利用物质在离心力作用下，按其沉降系数不同而分离的一种技术。 (2)、沉降现象 任何物体受地球引力的作用都具有下沉的现象，称为沉降现象。 υ=a*t=g*t (g为重力加速度，980cm/s2)。   物体在沉降过程中，其下沉的力在某个时刻总会与摩擦力、浮力达到平衡，使物体的受力为零，此时物体在做匀速运动，此时的速度称为临界速度。 2、基本原理与概念 （3）颗粒在重力场的运动 一个球型颗粒在具有重力场中的液体介质内，受到地球引力、溶液浮力和溶液黏滞力的作用，出现不同的运动(粘滞力和浮力向上，重力向下)。 重力　Fg＝1/6πd3ρpg （密度与体积的乘积） 粘滞力 　Ff=-3πηdv　(v为颗粒沉降速度，Stoke定律) 浮力 Fb=-1/6 π d3ρm g　(ρm为介质密度，阿基米德浮力定律) (d为颗粒直径，ρ为颗粒密度，g为重力加速度)。 2、基本原理与概念 当作用在颗粒上的总力为零时，颗粒做匀速运动，即达到临界速度，作用力的关系式为： 　　 Fg = Fb+Ff； 　 V＝d2(ρp-ρm)g/18η 小结： (a)、与颗粒直径d2的大小成正比，颗粒大沉降快。 (b)、与颗粒和介质密度差(ρp-ρm)成正比，密度之差越大，沉降越快。 (c)、当ρpρm，颗粒沉降速度为正值，即颗粒在介质中往下沉；等于，做不定向运动；小于，颗粒在介质中上浮。 (d)、与引力g成正比，速度随着引力的增加而增加。 (e)、与介质粘度η成反比，速度随粘度的增加而降低。 2、基本原理与概念 离心力的产生 从理论上讲，只要颗粒的比重大于液体就会发生沉降，但是对于分离生物材料的样品，如细胞、细胞器、细菌、病毒、蛋白质和核酸等生物大分子来说，由于颗粒非常细小，依靠自然沉降是不能达到完全分离的，只能通过离心力的作用才能使它们沉降下来。 物体在围绕转轴以角速度旋转时，就产生离心场，物体在离心场中受到离心力的作用。 离心场的受力：G＝ω2r (4)颗粒在离心场中的沉降 5种力：离心力，向心力，重力，浮力，介质摩擦力 2、基本原理与概念 电机的速度以每分钟的转数（r/min）表示。 G＝ω2r＝4π2N2r/3600 (N为每分钟的转数，单位为r/min；G的单位是cm/s2，正好与重力加速度g的单位一致。) (4)颗粒在离心场中的沉降 5种力：离心力，向心力，重力，浮力，介质摩擦力 2、基本原理与概念 　 在实践中，离心力可用重力加速度的倍数G/g来表示，称之为相对离心力，用RCF表示， 可将公式写成： RCF＝G/g=(4π2N2r/3600)/980=1.12×10-5N2r N=1000(RCF/11.2r)1/2 相对离心力（RCF） (4)颗粒在离心场中的沉降 5种力：离心力，向心力，重力，浮力，介质摩擦力 2、基本原理与概念 一般，低速离心，转速以r/min表示;高速离心，转速以重力加速度g表示。 计算颗粒相对离心力时，应注意离心管与中