- 1、本文档共2页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
支原体检测荧光法和PCR法灵敏度实验
支原体检测荧光法和PCR法灵敏度实验
目的
通过实验获得支原体检测荧光法和PCR法灵敏度数据,了解两种方法的灵敏度,以确定支原体检测采用的实验方法。
试验方法和材料
方法:用已知支原体污染的样本作为阳性样本,通过系列稀释,检测稀释后的样本的的支原体检测结果,用荧光法和PCR法两种方法检测,比较两种方法的差异。并且荧光法在第二次读数时,每2分钟读一次数,观察读数的变化。
实验材料和试剂:取支原体阴性细胞215和支原体阳性细胞216分别作为阴性和阳性实验样本。荧光法支原体检测试剂盒使用LONZA MycoAlert Mycoplasma Detection Kit ,PCR支原体检测试剂盒使用HD MycoScan。
实验步骤
把阴性样本215按30,120,480,1920倍稀释,把阳性样本216按30,60,120,240,480,960,1920,3840倍稀释。
按荧光法试剂盒操作步骤操作,把1系列稀释的样本进行检测,读取A值,并且在第一次A值读数后两分钟再读取A值一次。
按荧光法试剂盒操作步骤操作,读取B值,并且在第一次B值读数后每两分钟读取B值一次,一共读取10次。
计算B/A值的结果。
取1系列稀释的样本用PCR法检测。
实验结果
根据荧光法和PCR法检测结果比较,荧光法通过延长反应时间,可以检出稀释240倍的阳性216样本的支原体,PCR法检测支原体的灵敏度在本次实验中也是样本240倍稀释这个范围。所以通过改良后的荧光法和PCR法检测支原体的灵敏度是基本差不多的。而荧光法检测所需时间大概是1小时,而PCR法检测时间需要8小时左右,因此荧光法是一个更适合实验室支原体检测的方法。使用荧光法检测样本支原体在第一次读取B值后,在过20分钟读取一次B值,可以增加试剂的灵敏度,可最大化检测出支原体。
您可能关注的文档
- 托班科学教案.doc
- 托福听力考情分析及应对策略.doc
- 托福听力在几分钟内迅速提高的好方法.doc
- 执业医师最新最全考点解析系列药理学部分第三章胆碱受体激动药.docx
- 扫盲读本整本教案.doc
- 扬州中学2014年1月高二学业水平模拟测试(政治).doc
- 扬州市2011年初中毕业及答案.doc
- 扬州市五年级语文质量检测模拟试卷.doc
- 扬州市2015年高二学业水平测试模拟试卷(二)生物.doc
- 扬州朗阁雅思培训中心-解析雅思听力的发音区别_郭辉强.doc
- 原电池电动势的测定实验报告.pdf
- 与业主、设计、总包、监理和他承包人的配合措施.pdf
- 公司管理流程.pptx
- 2024_2025学年新教材高中地理第1章地球的运动素养综合训练新人教版选择性必修1.doc
- 2024_2025学年新教材高中地理第3章大气的运动第1节常见天气系统第1课时锋与天气分层作业新人教版选择性必修1.doc
- 2024_2025学年新教材高中地理第1章地球的运动第2节地球运动的地理意义第4课时正午太阳高度的变化四季更替和五带划分分层作业课件新人教版选择性必修1.pptx
- 2024_2025学年新教材高中地理第2章地表形态的塑造第2节构造地貌的形成第1课时地质构造与地貌课件新人教版选择性必修1.pptx
- 2024_2025学年新教材高中地理第1章地球的运动问题研究人类是否需要人造月亮课件新人教版选择性必修1.pptx
- 五片小雪花课件.pdf
- 2024_2025学年新教材高中地理第3章大气的运动第2节气压带和风带第1课时气压带和风带的形成分层作业课件新人教版选择性必修1.pptx
文档评论(0)