细菌菌落总数的测定详解.ppt

  1. 1、本文档共50页,可阅读全部内容。
  2. 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
食品微生物学检验 菌落总数的测定 一、? 目的 1、??学习并掌握食品中菌落总数测定方法和原理。 2?、了解菌落总数测定在对被样品进行卫生学评价中的意义 。 二、原理 细菌数量的表示方法由于所采用的计数方法不同而有两种:菌落总数和细菌总数。 1、菌落总数 是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后,所得1g或1mL检样中形成的细菌菌落总数。以 CFU/g(mL)来表示。 一定条件包括培养基成分、培养温度和时间、pH、是否需要氧气等。 按国家标准方法规定,即在需氧情况下, 36 ±1℃培养48±2 h,能在平板计数琼脂上生长发育的细菌菌落总数。所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。 菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,也不能区分其中细菌的种类,只包括一群在计数平板琼脂中生长发育、嗜中温的需氧和兼性厌氧的细菌菌落总数,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。 菌落总数主要作为判别食品被污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态,以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。 食品中细菌菌落总数越多,则食品含有致病菌的可能性越大,食品质量越差;菌落总数越小,则食品含有致病菌的可能性越小。须配合大肠菌群和致病菌的检验,才能对食品做出较全面的评价。 2、细菌总数 指一定数量或面积的食品样品.经过适当的处理后,在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。细菌总数也称细菌直接显微镜数。通常以1 g或1 mL样品中的细菌总数来表示。 三?、?材料 1、?食品检样 2、?培养基 平板计数培养基,无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液 3、?其它 无菌培养皿,无菌吸管,电炉、恒温培养箱等。 四、??流程 1、检样 2、做几个适当倍数的稀释液 3、选择2~3个适宜稀释度各1 mL,分别加入灭菌平皿内 4、平皿内倾注15~20 mL琼脂培养基,混匀 5、36 ±1℃培养48±2小时或(24±2)小时 6、记录稀释倍数和相应的各平板菌落数量 7、 计算菌落总数 → 报告 五、??步骤 (一)?????取样、稀释和培养 1、?以无菌操作取检样25g(mL),放于225mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液 的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振荡或研磨制成1:10的均匀稀释液。 固体和半固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1~2min,制成1:10的均匀稀释液。 2、用1 mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1 mL,沿管壁徐徐注入含有9 mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的试管内,振摇试管或反复吹打混合均匀,制成1:100的稀释液。 3?、另取1 mL灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次即换用1支1 mL吸管。 4、根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制作10倍递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。 同时分别取1ml稀释液(不含样品)加入两个灭菌平皿内作空白对照。 5?、稀释液移入平皿后,将冷却至46℃琼脂培养基注入平皿约15~20ml,并转动平皿,混合均匀。 6、?待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h,水产品30±1℃温箱内培养72±3h。 如样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(约4毫升),凝固后培养。 (二)?菌落记录方法 做平板菌落数记录时,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平皿的菌落总数后,求出同稀释度的各平板平均菌落数。 到达规定培养时间,应立即计数。如果不能立即计数,应将平板放置于0~4℃,但不要超过24h。 1、?平皿菌落数的选择 选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落总数测定标准。每一个稀释度应采用两个平皿,大于300的可记为多不可计。 2、其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片

文档评论(0)

boss + 关注
实名认证
内容提供者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档