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实验七 感觉器官结构观察 血红蛋白含量测定 ABO血型鉴定 三、实验器材 * 人体解剖生理学实 验 实验课件之七 临沂大学生命科学学院 王学斌 一、实验目的: 1.掌握比色法测定血红蛋白含量的方法。 2.掌握ABO血型鉴定的原理和方法,观察红细胞凝集现象。 3. 掌握眼和耳的形态;视网膜的组织结构;耳的分部、中耳的构成、内耳迷路的构成和组织结构。 二、实验原理: 在一定量的血液中,加入少量盐酸,破坏RBC膜,同时使红细胞内亚铁(Fe2+)血红素变成高铁(Fe3+)血红素,呈现较稳定的棕色。用蒸馏水稀释,与血红蛋白计的标准色目测比色,可得每100 ml血液中所含的血红蛋白克数或百分率。 (一)比色法(酸化法)测定血红蛋白: (二)血型鉴定: 血型多指红细胞血型,根据红细胞膜外表面的特异性抗原(凝集原)确定。抗体(凝集素)存在于血清,可与红细胞膜上的相应抗原起反应,产生凝集反应,最后发生RBC溶解。 感觉器官标本、模型、 血红蛋白计、0.1mol/L HCl 、酒精棉球、一次性刺血针、一次性20 ?l定量毛细取血管、滤纸、滴管、蒸馏水。 双凹载玻片、标准血清(A型和B型)、酒精棉球、一次性刺血针、消毒牙签。 血红蛋白计:①标准比色架,镶有棕色的标准色柱;②血红蛋白稀释管,方形,两侧有刻度,一侧以g为计数单位,对侧以百分率计,是按国人血红蛋白正常值14.5 g/100 ml为100%进行百分率刻度标记。 四、方法与步骤 (一)血红蛋白含量的测定: 1.用滴管加0.1 mol/L HCl于血红蛋白稀释管的刻度10处(用百分率计算的一侧)。 2.消毒指尖,用刺血针刺破指尖,采血(血滴宜大些)。用毛细取血管的尖端接触血滴,吸血至刻度20 mm3处(0.02ml)。 3.用滤纸片或棉球擦净毛细取血管口周围的血液,将毛细取血管插入血红蛋白稀释管的盐酸内,轻轻吹出血液至管底部,反复吸入并吹出稀释管内上层的盐酸,洗涤吸管多次,使毛细取血管内的血液完全洗入稀释管内。摇匀后,放置10 min,使盐酸与血红蛋白充分作用。 4.把稀释管插入标准比色架两色柱中央的空格中,使无刻度的两侧面位于空格的前后方,便于透光和比色。 5.用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水(每加一滴要搅拌),边滴边观察颜色,直至颜色与标准玻璃色柱相同为止。此时稀释管上液面的刻度读数即为100ml血液血红蛋白的克数。 【注意事项】 1.吹血液入稀释管及洗净吸管时,不宜用力过猛。 2.蒸馏水需逐滴加入,多做几次比色,以免稀释过量。每次比色时,应将搅拌用的玻璃棒取出,以免影响比色。 3.由于操作过程过长而造成吸管内血液凝固,堵塞管孔时,按下列溶液的顺序重复冲洗吸管,即用水→95%酒精→乙醚或丙酮。 【附录】 市售盐酸浓度是36~38%,即10.65~11.24N。 以12N计算的话,若要配1N HCl 100 ml, 则 100ml×1mol/L = 12mol/L×X X=8.3 ml (二)血型测定: 1.加标准血清:取双凹载玻片一块,A型标准血清(抗B)、 B型标准血清(抗A)各一滴分别加入左、右凹陷内。 2.采血:消毒,刺破左手无名指指尖一侧,玻片的每侧凹陷各放入1~2滴血。用牙签搅拌,使抗血清和血液充分混和(每边用一牙签,勿混用)。 3.反应:静置室温下10~15 min,观察有无凝集现象。 凝集反应的强度因人而异,有时需借助显微镜才能确定是否出现凝集. 仅A侧凝集,为B型; 仅B侧凝集,为A型; 两侧均凝集,为AB型; 两侧均未凝集,为O型。 (三)眼和耳的形态结构: 1.眼球壁和内容物的组成和功能;视网膜的组织结构。 2.耳的分部、中耳的构成、内耳迷路的构成和组织结构。 3.皮肤、舌与鼻腔的感受器。 1.填写自己的血红蛋白含量(保留小数点后一位)。说明是否正常,为什么? 2.填写自己的血型。根据自己的血型,说明你能接受何种血型的血液及输血方式,说明你能输血给何种血型的人及输血方式。 3.绘眼球冠状切面示意图。 本周值日: 3组: 王爱帅 李敏 王彦金 赵倩 2组: 宁守强 张
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