第三章病毒和亚病毒教案.pptVIP

七、 病毒的繁殖（二）、温和噬菌体和溶源菌 整合的DNA 为前噬菌体，或原噬菌体，原噬菌体一旦脱离宿主DNA就开始复制，引起宿主裂解（10-5）。含有原噬菌体的宿主细胞称为溶源菌，溶源菌所特有的性质为溶源性。 1、溶源性表现如下： 产生烈性噬菌体的潜在能力：10-2～10-5 具有同源噬菌体感染的免疫性（CI 抑制蛋白产生） 溶源菌在外界理化因子诱导下，可发生高频率的裂解 宿主细胞有时能产生新的生理特性，如溶源性白喉杆菌产生白喉毒素 第一节 病毒五．病毒的群体特征 2．?? 噬菌斑 少量烈性噬菌体与大量敏感细胞混合后，涂布在培养基平板上，一定温度下培养10-20h后，可见到嗜菌的透明小圆斑，为噬菌斑， 直径1-3mm左右------负菌落 3、空斑和病斑 以单层动物细胞受动物病毒侵染产生的透明斑为空斑。 肿瘤病毒感染单层动物细胞，产生细胞剧增。称为病斑 4、 枯斑 植物叶片上的植物病毒群体为枯斑。 噬菌体侵染大肠杆菌 噬菌斑 噬放线菌斑 六、噬菌体（bacteriophage,phage）的一般介绍 原核生物的病毒称为噬菌体， 真核生物的病毒为噬真菌体， 1987年电镜观察过2850种噬菌体，,其中2700种有尾。 包括蝌蚪状（dsDNA）、球状（ssDNA、ssRNA ）、丝状（ssDNA）。 七、 病毒的繁殖 以噬菌体为例，了解病毒的繁殖： 无个体生长过程，只是基本成分的组合： 核酸复制 + 蛋白质合成------装配为病毒粒子。 七、 病毒的繁殖（一）噬菌体的繁殖 1、繁殖过程 吸附---侵入----增殖（复制+合成）---装配----释放 （20～60min）完成为烈性噬菌体； 长时间完成为温和性噬菌体 尾丝与宿主特异结合，时间很短 宿主表面有多个吸附位点，如300， 不同噬菌体吸附的位点不同，如脂多糖、脂蛋白、磷壁酸、鞭毛等， 吸附可以受外界条件的影响，如阳离子、辅助因子、pH、温度等。 1.噬菌体的繁殖过程 （1）、吸附 （1）、吸附 每一个敏感细胞所能吸附的相应噬菌体的数量称为感染复数（m.o.i）, m.o.i一般可达到250-360，超大m.o.i可引起自外裂解 T4噬菌体从吸附到侵入只需15秒， 吸附引起构象变化，将核酸注入宿主细胞内， 而蛋白质外壳留在细胞外， 如果两种以上侵入，只有一种得以增殖。 （2）、侵入 （3）、增殖 T4噬菌体的dsDNA， 早期转录------早期蛋白 酶（RNA） 次早期转录-----次早期蛋白 酶（DNA） 晚期转录------晚期蛋白 （结构蛋白等） （4）装配、裂解、释放 各个部件自行装配 T4噬菌体需要30种蛋白参与 水解酶水解细胞膜、细胞壁-------裂解-----释放子代噬菌体 大肠杆菌T系列15---25min T2位150个，T4为100个 2、噬菌体的效价测定（噬菌体个数/ml） 0.1 0.2 噬菌体稀释液 敏感宿主菌液 双层平板检测噬菌斑 底层平板 上层平板 噬菌体+宿主 3、噬菌体的一步生长曲线 少量病毒与敏感细胞接触，病毒吸附后，高倍稀释，继续培养，定时取样测定培养物中的病毒效价，以感染时间为横坐标，病毒效价为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线，即一步生长曲线 潜伏期：释放子代病毒粒子所需的最短时间，（噬菌体以分钟计，动物病毒、植物病毒以小时或天计），大肠杆菌约25min 裂解量：每个受染细胞所释放产生的子代病毒数 目，几十到万个。 裂解量= 平稳期的平均噬菌斑数 / 潜伏期的平均噬菌斑数 七、 病毒的繁殖（二）、温和噬菌体和溶源菌 当噬菌体DNA进入细胞后，在宿主与病毒的相互作用下，病毒DNA整合到宿主的DNA上，同宿主DNA 同步复制，这种噬菌体为温和性噬菌体。 七、 病毒的繁殖（二）、温和噬菌体和溶源菌 当噬菌体DNA进入细胞后，在宿主与病毒的相互作用下，病毒DNA整合到宿主的DNA上，同宿主DNA 同步复制，这种噬菌体为温和性噬菌体。 * 第三章 病毒和亚病毒 第一节 真病毒 第一节 病毒一、病毒的概念 病毒：是一类超显微的非细胞生物,每一种病毒只含有一种核酸;它们只能在活细胞内营专性寄生;在离体条件下,它们以无生命的化学大分子状态存在. 病毒粒子：完整的、具有感染性的病毒颗粒。 1995年报告了4000余种病毒，归划为49个病毒科 第一节 病毒一、病毒的概念 特点： 个体极小