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干旱胁迫对拟南芥突变体chy1-10抗氧化酶活性的影响 答辩人:李慧 指导老师:刘家尧 教授 技术路线 3 立题依据 1 2 4 5 讨论 结果与分析 实验目的 立题依据 1、干旱对植物的影响 2、干旱胁迫下抗氧化酶的应答规律 3、拟南芥突变体耐旱性的推断 立题依据 1、干旱对植物的影响 最近几年,我国西南地区气候异常变化使得干旱现象不断增加,植物尤其是农作物由于水分缺失导致大量减产。 立题依据 1、干旱对植物的影响 干旱对植物的影响主要体现在干旱对植物生长发育、物质代谢、信号传递和保护酶系的影响。 立题依据 1、干旱对植物的影响 研究干旱胁迫对植物应答机制的影响对培育耐旱性植物具有极为重要的意义。 立题依据 2、干旱胁迫下抗氧化酶的应答规律 随着胁迫强度的增大、时间的延长,植物不同抗氧化酶活性会出现不同的变化规律。有的抗氧化酶会出现活性先升后降的变化。 立题依据 2、干旱胁迫下抗氧化酶的应答规律 对于抗氧化酶在不同情况下的活性变化规律,还需要结合植物体内活性氧浓度的改变综合研究。 立题依据 3、拟南芥突变体耐旱性的推断 同种植物不同基因型对环境胁迫的耐受性不同,由此可以筛选出在环境胁迫下最佳耐受基因型进行培育。 实验目的 本实验通过模拟不同程度的干旱胁迫处理突变体拟南芥chy1-10,通过测定其叶片中三种抗氧化酶——SOD、POD、CAT活性,揭示干旱胁迫对拟南芥突变体chy1-10抗氧化酶活性的影响,并对其是否具有抗旱性做出推断。 技术路线 无菌苗的获得 点种于1/2MS培养基中培养 4℃春化处理2-3d,光照培养7-10d 转移到1/2MS培养基中培养1周 移栽到土壤中继续培养4周 取叶片,测定SOD、CAT、POD活性,自由氧含量,并记录数据 观察拟南芥苗期长势 结果与分析 WT chy1-10 0mM WT chy1-10 25mM 图1 转移到1/2MS培养基中培养1周的拟南芥幼苗 结果与分析 图2 甘露醇模拟干旱对chy1-10突变体SOD活性的影响 结果与分析 图3 甘露醇模拟干旱对chy1-10突变体CAT活性的影响 结果与分析 图4 甘露醇模拟干旱对chy1-10突变体POD活性的影响 结果与分析 图5 干旱胁迫下突变体ROS含量 讨论 上述三种保护酶活性的变化说明了,突变体植株chy1-10保护酶系统的活力较野生型植株低,且通过野生型拟南芥幼苗叶内活性氧的含量低于突变型chy1-10的测定结果得到验证,所以推测突变体植株chy1-10在干旱胁迫下更敏感。 讨论 目前对植物抗氧化酶应答机制的研究逐步深入到基因水平,上述结论可以为进一步探究chy1突变型拟南芥在干旱胁迫下活性氧信号转导途径的作用机制做铺垫。 谢 谢 ! 请各位老师批评指正 由图看出,正常情况下,野生型和突变体在培养基上长势相似,当培养基外加25mM甘露醇处理7d,可以看到突变体植株长势弱小,有的植株甚至黄化死亡,野生型虽然长势变弱,但是依旧可以缓慢生长。 近几年我国某些地区干旱现象增加,导致农作物减产。 随着干旱胁迫的增加,不同植物的抗氧化酶会出不同的变化规律,如先升后降的变化。 转移到1/2MS培养基中培养1周:实验组含有0Mm、5Mm、10Mm、25Mm甘露醇 移栽到土壤中继续培养4周:在实验组的拟南芥幼苗分别浇1/2Hogland营养液配置的0mM、5mM、10mM、25mM?甘露醇溶液;对照组浇1/2Hogland营养液 * * 由图看出,正常情况下,野生型和突变体在培养基上长势相似,当培养基外加25mM甘露醇处理7d,可以看到突变体植株长势弱小,有的植株甚至黄化死亡,野生型虽然长势变弱,但是依旧可以缓慢生长。

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