《DNA重组技术的基本工具》分析报告.pptVIP

基因工程 治疗糖尿病特效药—— 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过 和 ，赋予生物以 ，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 问题探讨： 　　　苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。 　　　让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达，可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。 想一想需要做哪些关键工作？ 思考： ⒈自然界是否存在一种生物的DNA进入另一生物的情况？ 2.单细胞生物并没有在进化 中灭绝，有何保护机制？ 1.“分子手术刀”——限制酶 （1）来源：主要是从 中分离纯化出来的。 （2）功能： ①能够识别双链DNA分子的某种特定的 ， ②并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开. (切割部位一般都具有反向重复序列） 因此具有专一性(特异性）。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 和 。 思考与探究 P7 （2） 1、细菌中含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中不具备这种限制酶的识别切割序列； 2：通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。 　 　 二、“分子缝合针” —— DNA连接酶 　 三、“分子运输车” ——基因进入受体细胞的载体 ⒈载体需要的条件： 　　⑴有1~多个限制酶切点 　　⑵对受体细胞无害 　　⑶导入基因能在受体细胞中复制、表达 　　⑷有某些标记基因，便于筛选 ⒉常用运载体： 　 ⑴细菌的质粒 　 ⑵噬菌体或某些动植物病毒 实际上自然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件，都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。 1） 载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。这些供目的基因插入的限制酶的切点所处的位置，还必须是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于因目的基因的插入而失活。 2） 载体DNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。 3） 载体DNA必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。 * 专题1 每100kg 猪或牛的胰腺中仅可提取4~5g。 　　1979年，美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌内，实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本。 据WTO调查： 2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿人，我国约6000万。 胰岛素 思考：转基因技术实现了一种生物的某些性状 在另一种生物中表达。这些性状的表达与我们学过的基因的什么过程有关？ 密码子在生物界是　　　的！ DNA(基因)　　　mRNA 蛋白质(性状) 转录 翻译 共用 基因工程的产物 基因工程是在 水平上进行设计和 施工的，又叫做 技术。 定向地改造生物的遗传特性。 转基因技术 体外DNA重组 DNA分子 DNA重组 新的遗传特性 基因工程的概念 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 苏云金芽孢杆菌 毒蛋白 普通棉花　　抗虫棉 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与棉花DNA“缝合” 关键步骤三： 抗虫基因进入棉花细胞 一、DNA重组技术的基本工具 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ “分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与棉花DNA“缝合” 关键步骤三： 抗虫基因进入棉花细胞 “分子缝合针”—— DNA连接酶 “分子运输车”—— 基因进入受体细胞的载体 1.1、DNA重组技术的基本工具 　　可能产生了一些特殊的酶来防范。可而这种酶能识别外来侵入的DNA并将其分解，而对自身的DNA不能起作用。 “分子手术刀”——限制性核酸内切酶 原核生物 核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA？ T 磷酸二酯键 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A Go back 区别 DNA解旋酶 限制酶 限制性内切酶与解旋酶的区别 切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯键 将DNA两条链的氢键打开形成两条单链 限制酶的识别序列： 能