益肾化湿颗粒治疗大鼠糖尿病肾病中ERK表达及意义.docVIP

益肾化湿颗粒治疗大鼠糖尿病肾病中ERK表达及意义 　　[摘要] 目的 探讨益肾化湿颗粒在治疗大鼠糖尿病肾病中的ERK表达及其意义。方法 将40只SD（Sprague-Dawley）大鼠随机分为正常对照组（N组）、糖尿病肾病组（DN组）、益肾化湿颗粒治疗组（DN+Y组）、贝那普利治疗组（DN+B组）。对照组用等量柠檬酸缓冲液腹腔注射，糖尿病肾病组和各治疗组制备糖尿病模型，取血检测血糖（GLU）、血清肌酐（SCr）、血清尿素氮（BUN）、24 h尿蛋白定量，以免疫组化方法检测各组肾组织p-ERK1/2表达及其意义。 结果 治疗后8周，DN组大鼠血糖明显升高，血清肌酐（SCr）、血清尿素氮（BUN）、24h尿蛋白定量等指标与N组相比明显升高，二者差异有统计学意义（P0.05）。 结论 在糖尿病肾病的产生、发展过程中，ERK参与其中，其表达增加可能对DN的进一步发展造成影响；益肾化湿颗粒能够对DN大鼠肾皮质中ERK的活性予以有效限制，从而对DN肾脏起到一定的保护作用，这说明益肾化湿颗粒在糖尿病肾病的治疗中表达明显，具有较高的临床应用价值。 中国论文网 /6/view-7249965.htm 　　[关键词] 益肾化湿颗粒；糖尿病肾病；细胞外信号调节激酶 　　[中图分类号] R587.2 [文献标识码] A [文章编号] 1672-4062（2016）02（b）-0052-04 　　糖尿病是当前在临床上一种发生几率较高的慢性代谢性疾病，影响患者的日常生活，甚至对生命健康直接造成威胁，而糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN） 则是该病诸多并发症中最为严重的一种[1]。DH的临床症状集中变现为早期水肿、高血压，晚期肾功能损害[2]。由于目前糖尿病的发病率高居不下，且愈演愈烈之势，针对糖尿病肾脏疾病的临床研究与诊治已经刻不容缓，然而当前学界关于DN的具体发病机制依然没有达成一致共识。一般认为，DN的发生可能与包括细胞因子、糖脂异常代谢活动、生长因子等诸多综合因素的影响作用有关[3]。近年来的文献报道显示，胞外信号调节激酶（ERK）与DN之间存在密切关联；同时学界也开始尝试探讨益肾化湿颗粒在DN临床上的疗效及其病理表达[4]。该次实验通过研究益肾化湿颗粒治疗大鼠糖尿病肾病中ERK表达及意义，取得了一定成效，现报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　1.1.1 动物 雄性SD大鼠 40 只，6～8周龄，体重（200±20）g。 　　1.1.2 试剂 p-ERK1/2 （Thr202/Tyr204）多克隆抗体。益肾化湿颗粒，广州康臣药业有限公司生产，生产批号040930，国药准字规格： 10 g/袋×9袋。 　　1.2 方法 　　1.2.1 动物模型制备与分组 40只SD大鼠饲养一周后，随机抽取10只为正常对照组（N组），喂养普通饲料；其余30只喂养高糖高脂饲料，30 d后予以腹腔注射50 mg链脲佐菌素（STZ）造成糖尿病模型，连续两次血糖≥16.7 mmol/L者即为造模成功。30只大鼠分为糖尿病肾病组（DN组）、益肾化湿颗粒治疗组（DN+Y组）、贝那普利治疗组（DN+B组）各10只。对糖尿病组和各治疗组制备糖尿病模型，对照组则用等量柠檬酸缓冲液腹腔注射。成模后各治疗组大鼠每天分别用益肾化湿颗粒溶液[150 mg/（kgd）]、贝那普利水溶液（浓度为0.11%）按10 mg/（kgd）的剂量进行治疗性灌胃，对照组和糖尿病肾病组用等量生理盐水灌胃。所有大鼠实验期间均食用标准饲料，自由饮水，不使用胰岛素和其他降糖药物，连续观察8周后收集标本[5-6]。 　　1.2.2 标本留取 观察8周后称体重，留24 h尿，24 h 尿蛋白（mg） = 24 h尿量（mL）×尿蛋白含量（g/L）。经乙醚麻醉后，采血，抗凝分离血浆，留待检测。迅速打开腹腔，游离并摘除双肾，称取肾重，左肾去包膜后，切取10 mm3组织块，放入4%多聚甲醛中固定，4 ℃保存；常规石蜡包埋，4 μm切片，予以HE染色、PAS染色；切取1 mm3组织块，放入0.25%戊二醛溶液中，4 ℃保存[7]。 　　1.2.3 观察指标 P-ERK1/2表达、肾功能指标（包括血糖GLU、血清肌酐SCr、血清尿素氮BUN、24 h尿蛋白定量）。 　　1.3 统计方法 　　应用SPSS 19.0统计软件进行数据统计处理，以均数±标准差（x±s）表示计量资料，两组均数比较采用t检验。 　　2 结果 　　2.1 对血糖（GLU）的影响 　　治疗8周后，DN组大鼠的血糖（22.17±1.03）mmol/L与N组（4.88±0.26）mmol/L相比明显升高，二者差异有统计学意义（P0.05）。见表 1。 　　2.2 对S