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第讲基因工程和细胞工程
1.表解比较法理解限制酶、DNA连接酶和载体的作用。
2.实例分析法理解基因工程的原理与过程。
3.列表比较法理解两个不同:植物组织培养和动物细胞培养的不同、植物体细胞杂交与动物细胞融合的不同。
4.图解法理解单克隆抗体的制备过程。
【自主回顾】
一、判断正误
1.生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶( )
2.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列( )
3.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸( )
考向一
基因工程4.应用DNA探针技术可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达( )
5.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点( )
6.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上,属于基因工程( )
7.转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增加( )
8.动物的生长激素基因转入植物后不能表达( )
答案:1.× 不需要DNA连接酶。
2.√ 这是限制酶的特性决定的。
3.× 限制酶切割的是DNA,烟草花叶病毒的核酸是RNA。
4.× 不能检测其完全表达。
5.√ 载体的特点之一是至少含一个限制性核酸内切酶识别位点。
6.× 噬菌体DNA整合到细菌DNA上属于基因重组,不是人工操作,基因工程是人工操作。
7.× 在转抗虫基因植物的选择作用下,抗性强的昆虫得以保留。
8.× 基因工程打破了物种的界限。
二、知识填空
1.比较限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶和解旋酶
2.基因工程的操作步骤
(1)目的基因的获取
(2)基因表达载体的构建
组成:+++。
目的基因
启动子
终止子
标记基因
②构建过程
(3)将目的基因导入受体细胞
(4)目的基因的检测与鉴定
【典例剖析】
(2014·课标全国理综)植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题:
(1)理论上,基因组文库含有生物的______________基因;而cDNA文库中含有生物的______________基因。
(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,再从中________出所需的耐旱基因。
(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物________的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因的________,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株的________是否得到提高。
(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时,则可推测该耐旱基因整合到了________(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。
【解析】 (1)基因组文库含有某种生物的全部基因,cDNA文库含有某种生物的部分基因。
(2)可从基因组文库中筛选所需基因,如耐旱基因。
(3)受体细胞应为植物乙的体细胞。确认某基因是否正确表达,应检测其表达产物。检测植株的耐旱性是从个体水平进行鉴定。
(4)如果耐旱基因整合到同源染色体的一条上,会在减数分裂中产生两种比例相同的配子,在后代中出现31的性状分离比。如果耐旱基因整合到同源染色体的两条上,则后代应全为耐旱植株。
【答案】 (1)全部 部分
(2)筛选 (3)乙 表达产物 耐旱性
(4)同源染色体的一条上
【探究追问】 (1)基因工程的原理是什么
(2)基因工程的核心步骤是什么
提示:(1)基因重组。
(2)构建基因表达载体。
(1)切割质粒和目的基因的限制酶一般是同一种酶,以获得相同的黏性末端,有利于重组质粒的构建。
(2)只有第三步“将目的基因导入受体细胞”过程中不发生碱基互补配对,其他步骤均发生碱基互补配对。
【举一反三】
1.(2014·天津理综)为达到相应目的,必须通过分子检测的是( )
A.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选
B.产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选
C.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定
D.21三体综合征的诊断
解析:解答此题可结合基因工程的第四步:目的基因的检测和鉴定。鉴定水平分为分子水平、细胞水平以及个体水平。受体菌的筛选属于个体水平,不需要分子检测,故A错误。杂交瘤细
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