DNA重组技术的基本工程重点分析.ppt

来源：原核生物 作用特点：特异性，即识别特定核苷酸序列（反向对称重复排列），切割特定切点（磷酸二酯键）。 结果：产生黏性未端（碱基互补配对）或平末端。 限制酶所识别的序列有什么特点 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 * * * 专题1 1.1 DNA重组技术的基本工具 基因工程 脱氧 核糖 含氮碱基 磷酸 A G C 碱基 DNA化学组成 DNA全称：脱氧核糖核酸 组成元素：C、H、O、N、P 基本单位：脱氧核糖核苷酸 脱氧核苷酸 两个脱氧核苷酸通过3，5－磷酸二酯键连接 基因工程的概念： 又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 原理 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 基因重组 生物体外 基因/DNA 分子水平 剪切→拼接→导入→表达 人类需要的基因产物 优点： 定向地改造生物的遗传性状； 实现基因在不同物种之间的转移，迅速培育出生物新品种 基因工程产品 抗虫害的玉米 转鱼抗寒基因的番茄 转基因鲑鱼 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 棉花细胞(含抗虫基因) 抗虫棉(有毒蛋白) 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 重组DNA 导入 形成 基因工程培育抗虫棉 的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 形成重组DNA 关键步骤三： 重组DNA导入受体(棉花)细胞 基因工程培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ （二）DNA重组技术的基本工具 分子手术刀—限制性核酸内切酶 分子缝合针—DNA连接酶 分子运输车—运载体 二、基因工程的基本工具 1、限制性核酸内切酶----“分子手术刀” 限制酶的识别序列： 能被限制性内切酶特异性识别的切割部位都具有回文序列：在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。 什么叫黏性末端？ （二）DNA重组技术的基本工具 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 作用：连接双链的DNA片段，形成磷酸二酯键。 种类： E·coli DNA连接酶（黏性末端）-大肠杆菌 T4 DNA连接酶（黏性末端、平末端）- T4噬菌体 2、DNA连接酶----“分子缝合针”