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实验二球菌，杆菌 化脓性球菌 革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链球菌 革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌， 淋病奈瑟菌 N. gonorrhoeae N.meningitidis S. pneumoniae staphylococcus Streptococcus 菌落中等大小、不透明 、表面光滑、边缘整齐 完全溶血、 金黄色 金黄色葡萄球菌 不溶血、 白色 表皮葡萄球菌 不溶血、柠檬色 腐生葡萄球菌 葡萄球菌鉴别 菌落小、半透明、表面光滑、边缘整齐 G+ 、链状 完全溶血 乙型溶血性链球菌 不溶血 丙型溶血性链球菌 草绿色不完全溶血环 甲型链球菌 肺炎链球菌 胆汁溶菌试验 -（混浊） +（澄清） 链球菌鉴别 脓汁或 喉拭子 涂片、革兰染色、镜检 血琼脂平板 观察菌落特征 及溶血情况 生化反应、致病力试验及药敏试验 脓汁标本病原性球菌的分离鉴定 由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌，可初步诊断为脑膜炎球菌 由泌尿、生殖系统来源的标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌，可初步诊断为淋球菌 37℃ 24h 脓汁标本病原性球菌的分离鉴定 根据菌落特点及涂片检查作出初步判断，然后： 菌落中等大小、完全溶血、不透明、金黄色、G+，葡萄状排列，可能是金黄色葡萄球菌，可进一步做血浆凝固酶试验和甘露醇发酵试验，确定其致病力。 菌落小、半透明、完全溶血、G+ 、链状，为乙型溶血性链球菌 菌落小、半透明、绿色不完全溶血环，G+ 、短链状，为甲型溶血性链球菌或肺炎链球菌，通过胆汁溶菌和菊糖发酵试验进一步鉴别。 葡萄球菌血浆凝固酶试验 取一个载玻片，划分3格，标记1、2、3。 在格内分别滴加： 1：兔血浆一滴 2：兔血浆一滴 3：盐水一滴 以接种环挑取细菌混悬于液滴中： 1：金黄色葡萄球菌 2：白色葡萄球菌 3：金黄色葡萄球菌 立即观察结果。 粪便标本肠道杆菌的分离鉴定 克氏双糖铁 培养基 尿、靛、动 培养基 分析结果 SS 平板 EMB平板 挑取可疑菌落 玻片凝集试验 粪便 SS平板－分离肠道病原菌的强选择培养基 成分和作用： 基础培养基：提供氮源和碳源 胆盐、枸橼酸钠、煌绿：可抑制肠道非致病菌的生长，而对肠道致病菌抑制作用弱。 乳糖，中性红（pH6.8-8.0，红→橙黄） ：致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨产生碱性物质→菌落淡黄色；大肠杆菌分解乳糖产酸，菌落呈红色 病原菌:小,无色,半透明 非致病菌:大,红色 EMB（Eosin Methyl Blue)平板－分离肠道病原菌的弱选择培养基 成分和作用： 基础培养基：提供氮源和碳源 伊红、美蓝：可抑制肠道非致病菌的生长，而对肠道致病菌抑制作用弱。 乳糖，伊红、美蓝：致病菌不分解乳糖→菌落无色半透明；大肠杆菌分解乳糖产酸，菌落呈紫黑色 病原菌:半透明,无色 非致病菌:紫黑色 克氏双糖铁培养基 接种方法 如何观察 上层含乳糖部分 乳糖发酵：致病菌红色，非致病菌黄色 H2S 然后观察下层 发酵葡萄糖（产酸产气） 动力 乳糖 硫酸亚铁 固体 葡萄糖 半固体 指示剂:酚红 乳糖 葡萄糖 硫化氢 尿素 靛基质 动力 大肠杆菌 黄色 + - - + + 痢疾杆菌 红色 + - - +/- - 伤寒杆菌 红色 + +/- - - + 副伤寒杆菌 红色 + + - - + 变形杆菌 红色 + + + +/- + 肥达试验(Widal Test) 原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及甲型副伤寒、肖氏沙门菌、希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。 用途：辅助诊断伤寒，副伤寒 方法： 取小试管32支，分成4排，每排8支，依次标号。 于小试管内各加入0.5ml生理盐水。 在每一排第1管中各加患者血清0.5ml，吸打混匀，吸取0.5ml 加入第2管作对倍稀释……依次稀释至第7管弃去0.5ml ，第8管为对照。2~3排按同法稀释。 按8.7.…1列的顺序，分别对第1排各管加入伤寒H抗原0.5ml ；第2排各管加入O抗原0.5ml ；同样对第3排各管加甲型副伤寒（PA）H抗原0.5ml ；第4排各管加乙型副伤寒（PB）H抗原0.5ml 。 将各管混匀