DNAreplication,mutation,injuryandrepair重点分析.ppt

DNA复制错误 凯恩斯的实验结果可得到两个重要的结论 乳糖可诱使Lac +突变种持续产生，而不是因为饥饿所导致； 乳糖诱使细菌产生特定方向的突变，也就是乳糖只会诱使大肠杆菌的LacZ基因产生突变，而不影响其他的基因。 五、基因突变在药物评价中的应用 三、突变体的分离与分析 （一）突变体的分离： 分子生物学研究中，基因突变可以在体外按照人们的设计进行，但是仍然有很多不需要的突变体，因此需要分离，方法有： 利用遗传分析方法，筛选、选择、富集需要的突变体，常见的例子是利用抗性基因，使带有抗性基因的突变体可以生长，其它被杀死。 （二）突变体的分析： 遗传检测法 ⑴ 根据重组载体的抗药性标志筛选： 如抗氨芐青霉素（anpr）、抗四环素(terr)、抗卡那霉素(kanr)等。当培养基中含有抗生素时，只有携带相应抗药性基因载体的细胞才能生存繁殖，这就把凡未能接受载体DNA的细胞全部筛除掉了。 如果外源目的序列是插入在载体的抗药性基因中间使这抗药性基因失活，这个抗药性标志就会消失。 点突变：通常指碱基替代，点突变又可分为：单点突变（point mutation）和多点突变（multiple mutation）。可以分为转换（transitions）和颠换（transversions）两类。转换：嘌呤和嘌呤之间的替换，或嘧啶和嘧啶之间的替换。颠换：嘌呤和嘧啶之间的替换。 碱基插入（base i