沉淀分离技术在蛋白质处理方面的应用概要.pptVIP

* 沉淀分离技术在蛋白质 处理方面的应用 专业：分析化学 学号：20144015016 姓名：骆洪伟 内容 一、变性沉淀分离技术 二、絮凝分离技术 一、变形沉淀分离技术 1.基本原理及方法 原理： 利用生物大分子物质对物理、化学等外部环境因子敏感性的差异而选择性地使一种组分发生变性形成沉淀，而另一些组分保持不变，从而达到分离、除杂和提纯的目的。 变性沉淀分离的方法有: ①热变性沉淀分离 利用蛋白质热稳定性不同的特点，使蛋白质组分之间得以分离，同时使蛋白质与水及其他可溶物分离，此法常用于组织化植物蛋白的生产。 ②选择性酸碱变性沉淀分离 利用酸碱变性原理，通过调节溶液pH值，可有选择地去除杂蛋白，常用于生化制备中。 ③利用酶进行变性分离 利用酶的催化作用使一些蛋白质变性，从而沉淀分离，如凝乳酶催化牛乳酪蛋白的沉淀。 ④利用表面活性剂或有机溶剂引起变性沉淀分离 在制备核酸时，可加入含水酚、氯仿以及十二烷基磺酸钠等试剂，有选择地使蛋白质发生变性沉淀，达到去除杂质、提纯核酸的目的。 2.影响蛋白质变性的因素 ①温度 在较高温度作用下，蛋白质的二级、三级和四级结构的弱键断裂，破坏了肽链原来特有的排列和空间结构，使原来在大分子内部的极性基团转到分子表面，促进蛋白质分子相互凝集而沉淀，但温度过高又会使蛋白质发生变性。 ②pH值