中药制剂的毒理学试验.docVIP

中药制剂的药理、毒理学实验技术要求 一、概述 （一）安全性评价目的 安全、有效是药物制剂必要具备的两大要素，因此正确评价药物的安全性和有效性，具有同等重要的意义。毒理学研究是保证药物安全性评价的重要一环，是药物开发研究中以实验数据客观地反映其安全性的科学方法，符合临床需要。 中药制剂毒理学研究的目的，在于揭示药物固有的毒性，认识毒性的性质及程度，了解毒性反映的靶器官（特别是首先出现毒性的靶器官）及毒性反应的可逆性。它一方面为临床安全用药提供导向，如药物的毒性大小，中药的先兆症状是什么？如何监测？毒性产生后的可逆程度及恢复时间等；另一方面为确定临床治疗剂量提供依据，如通过对动物的最小致死量（或最大耐受量）与药效学有效剂量的比值，估算出药物的安全范围，为临床用药的可变动范围提供重要参考；最后，它为确定药物临床禁忌症提供参考。 （二）安全性评价必要性 1、由于历史条件的限制，绝大多数中药或传统成方制剂没有进行过系统的现代毒理学研究。 2、药用有效组分或单体成分中药制剂的研制，其安全性不容忽视。 3、采用新的给药途径的中药制剂，如中药注射剂或气雾剂，更应注意进行安全性评价。 4、新资源的开发，如人工制剂、代用品等，也需进行安全性评价。 （三）安全性评价的范围 除新药五类制剂外，所有新药都应该作毒性试验。毒性试验分急毒性试验、长期毒性试验和特殊毒性试验三大类。其中新药药材一类和新药制剂一类需进行上述三项试验，药材和制剂二、四类仅需作前两项毒性试验。此外还有一些特殊规定，如：中药注射剂应进行必要的制剂安全性试验（如热原试验、刺激性试验、过敏试验、溶血试验等）；新药制剂四类仅改变剂型及制剂工艺，提取工艺未改变者，可视情况免作毒性试验。 （四）安全性评价的基本要求 《中药新药研究指南》（药学、药理学、毒理学）中，规定了中药新药毒理学研究的基本要求，包括以下几方面内容：（1）试验人员及承担科研单位应符合规定条件；（2）受试物的稳定与临床用药的一致性；（3）实验动物从业人员应具资格，持证上岗，实验动物应符合国家规定的等级动物要求；（4）实验条件设施及组织管理应基本上符合规范化要求；（5）试验设计要有针对性；（6）试验记录应采用先进、科学、可靠的仪器，标准统一，并注意原始资料的保存；（7）资料整理及符合形式审查要点。 二、急性毒性试验 （一）试验目的 观察受试物一次或一天内2~3次给予动物后产生的急性毒性反应和死亡情况；或观察动物在最大给受试物体积和浓度的条件下，不产生死亡的最大耐受量。 （二）试验材料 1、动物 选用体重18~22克，6~8周龄的健康小鼠（同次试验体重相差不超过2克）。大鼠6~8周龄；体重120~150克，同次试验体重相差不超过10g。 2、受试物 溶于水的做成溶液，不溶于水的可用0.5%羧甲基纤维素钠，或10%阿拉伯胶制成混悬剂。 （三）试验方法 1、半数致死量（LD50）的测定 （1）剂量选择：一般选用4~5个剂量组，各剂量组间间距应根据受试物毒性大小和预试结果而定，一般以0.65~0.86为宜。 （2）给受试物途径及体积：给药途径：三、四、五类新药制剂可选择与临床试验的途径相一致。一、二类新药应采用两种途径给药，其中一种应为推荐临床研究的给药途径。水溶性好的药物还应测定静脉给药的急性毒性。口服药物应灌胃给药。 给药体积：小鼠禁食（12~16h），不禁水；大鼠禁食（12~16h），不禁水，其给药体积见表1。 表1 大、小鼠给药体积 灌胃（ig） 静脉内（iv） 腹腔内（ip） 皮下(sc) 小鼠给药体积 ≤0.4ml/10g ≤0.5ml/只 ≤0.5ml/只 ≤0.5ml/只 大鼠给药体积 ≤3ml/只 ≤1.0ml/只 ≤1.5ml/只 ≤1.0ml/只 （3）实验分组和观察：试验时，将动物按体积随机分成4~5组，每组至少10只动物（雌雄各半），给受试物后即刻观察动物反应情况，每天观察一次，连续观察7~14天。记录动物毒性反应情况及死亡动物分布。 观察毒性反应，应注意记录动物的外观、行为活动、精神状态、食欲（饲料消耗量）、大小便及其颜色、被毛、肤色、呼吸、鼻、眼、口腔无异常分泌物，体重变化及死亡情况，见表2，表3。死亡动物应及时进行尸检，记录病变情况。若有肉眼可见变化时则需进行病理检查。 （4）结果处理、实验报告和结果评价 表2 啮类动物急性毒性试验中应注意出现症状和检查方法 器官系统 检查方法 毒性表现 中枢和动物 行为 行为变化、不正常叫声、躁动不安或静伏少动 神经系统 异常运动 抽搐、震颤、麻痹、局部肌肉抽动、强迫运动 对刺激的反应 烦躁易怒、冷漠、感觉过敏、抑制状态 神经反射（含翻正反射） 迟钝、丧失 肌张力 僵硬、松驰 植物神经系统 瞳孔 缩小、扩大 分泌物 流涎、流泪