单色光.ppt

例： 维生素B12的含量测定 精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100μg / mL） 解： 二、定量分析方法 1．标准曲线法 第四节? 定性与定量分析方法 芦丁含量测定 0.710mg/25mL 第四节? 定性与定量分析方法 2．标准比较法or对照法：外标一点法 注：当样品溶液与标准品溶液的 稀释倍数相同时 第四节? 定性与定量分析方法 3．吸光系数法（绝对法） 第四节? 定性与定量分析方法 例：维生素B12 的水溶液在361nm处的百分吸光系数为207，用1cm比色池测得某维生素B12溶液的吸光度是0.414，求该溶液的浓度 解： 例：精密称取B12样品25.0mg，用水溶液配成100ml。精密吸取10.00ml，又置100ml容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，于361nm处测定吸光度为0.507，求B12的百分含量？ 解： 第四节? 定性与定量分析方法 1）对照法 2）吸光系数法 第四节? 定性与定量分析方法 三、光电比色法 （一）对显色反应的要求 （二）显色反应条件的选择与控制 显色剂用量 溶液的酸碱度 显色时间 温度 溶剂 第四节? 定性与定量分析方法 （三）参比溶液的选择 原则：扣除非待测组分的吸收 以显色反应为例进行讨论 M + R = M-R ?max 试液 显色剂 溶剂 吸光物质 参比液组成 无吸收 无吸收 光学透明 溶剂 基质吸收 无吸收 吸收 不加显色剂的试液 无吸收 吸收 吸收 显色剂 基质吸收 吸收 吸收 吸收 显色剂 + 试液 + 待测组分的掩蔽剂 若欲测 M-R 的吸收 ?max A （样） = A （待测吸光物质） + A （干扰）+ A （池） A （参比） = A （干扰）+ A （池） 溶剂参比 试剂参比 样品参比 平行操作参比 第四节? 定性与定量分析方法 （四）共存物质干扰的消除 加入掩蔽剂 选择适当的显色条件 分离干扰离子 第四节? 定性与定量分析方法 * * * 分 析 化 学 Analytic Chemistry 赵小菁 基础医学部 第九章 紫外可见分光光度法 第一节 光谱分析法概述 第二节 光的吸收定律 第三节 紫外-可见分光光度计 第四节 定性与定量分析方法 第一节 光谱分析法概述 分光光度法是利用被测物质对光的吸收特征和吸收强度对物质进行分析的方法。 ? ?射线 x射线 紫外光 红外光 微波 无线电波 10-2 nm 10 nm 102 nm 104 nm 0.1 cm 10cm 103 cm 105 cm 可 见 光 400nm 760nm 分光光度法是利用被测物质对光的吸收特征和吸收强度对物质进行分析的方法。 紫外-可见分光光度法(UV-vis)是研究物质在紫外(200~400nm)-可见光(400~760nm)区分子吸收光谱的分析方法。 1.灵敏度高 2.精密度和准确度较高 3.仪器设备简单 4.选择性较好 5.应用范围较广 第一节 光谱分析法概述 第一节 光谱分析法概述 一、电磁辐射和电磁波谱 电磁辐射是一种以电磁波的形式在空间不需任何物质作为传播媒介的高速传播的光(量)子流。 波动性 微粒性 第一节 光谱分析法概述 高能辐射区 γ射线 能量最高，来源于核能级跃迁 χ射线 来自内层电子能级的跃迁 光学光谱区 紫外光 来自原子和分子外层电子能级的跃迁 可见光 红外光 来自分子振动和转动能级的跃迁 波谱区 微波 来自分子转动能级及电子自旋能级跃迁 无线电波 来自原子核自旋能级的跃迁 电磁波谱：电磁辐射按波长顺序排列，称~。 γ射线→ X 射线→紫外光→可见光→红外光→微波→无线电波 波长 长 二、光谱分析法的分类 光谱吸收法是物质与电磁辐射相互作用后发生能量交换，从而内部发生能级跃迁的光学分析法。 （一）吸收光谱法 利用物质对电磁辐射的选择性吸收而得的光谱分析法。 （二）发射光谱法 利用发射的特征光谱进行定性、定量分析的光谱分析法。 第一节 光谱分析法