第二基因工程与食品产业精要.ppt

1.反义基因技术的产生与发展 反义DNA和RNA的发现和研究始于原核生物。RNA具有调节基因表达的功能。但开始的研究集中于原核生物。直到真核生物自然存在反义系统的发现，反义技术在真核生物中的研究才得以迅速发展。随其研究而发展形成的反义技术，提供了一种更为直接有效的人为控制基因表达的方法，而备受生物学界关注。 2.反义基因技术的原理 反义RNA技术是把一段DNA序列以反义方向插入到合适的启动子和终止子之间，转录产生反义RNA，与有意义的mRNA通过碱基互补，形成反义RNA／mRNA杂交分子，从而抑制或封闭mRNA正常的翻译和表达，达到特异性抑制或向下调解靶基因的表达效果。把此基因构建体转化到受体细胞中去，就可获得特定基因表达受阻而其他不相关基因的表达不受影响的转基因生物。 一、基因研究的发展过程 二、DNA的组成、结构和功能 三、基因工程的概念及主要内容 四、DNA分子的提取与检测 五、工具酶和基因载体 六、基因工程的基本技术 七、基因工程在食品产业中的应用 7.1 基因工程在食品产业中的应用 改造食品微生物 改善食品原料的品质 生产功能性食品 （1）利用基因工程改造食品微生物 改良微生物菌种 面包酵母中的麦芽糖 透性酶、麦芽糖酶基因 产品品质提高 大麦中的?-淀粉酶 基因导入啤酒酵母 直接利用淀粉 发酵，简化工序 乳酸菌中的耐药质粒 保证食品安全性 小牛胃中的凝乳酶 基因导入细菌或真核微生物 提高 产品产率 （2）利用基因工程改善食品原料的品质 动物食品原料 生长速度快、抗病力强、 肉质好的转基因动物 植物食品原料 碳水化合物改良 蛋白质改良 油脂改良 改变淀粉组成及含量 提高必需氨基酸的含量 改善蛋白质的加工性能 增加脂肪酸的饱和度 降低脂肪酸的饱和度 增强果蔬食品的贮 藏性和保鲜性能 改善园艺产品 的采后品质 改良主要营养元素 提高牛乳的热稳定性, 改善食品加工特性 （3）利用基因工程生产功能性食品 功能食品是指具有与生物防御、生物节律调整、防止疾病、恢复健康等有关的功能因素,经设计加工,对生物体有明显调整功能的食品。 例如，食品疫苗是将某些致病微生物的有关蛋白质(抗原)基因,通过转基因技术导入某些植物或动物受体细胞中,并使其在受体细胞中得以表达,从而使受体植物或动物直接成为具有抵抗相关疾病的疫苗。食品疫苗与传统的注射疫苗相比,有更大的优越性,如成本低、安全性好,易推广等。现在这一研究已取得了令人鼓舞的成果。 思考题 1.什么是基因工程？基因工程的操作步骤有哪些？ 2. 如何采用PCR技术从生物材料中分离出目的基因？ 3.谈谈基因工程在食品工业上的应用和发展趋势。 (7)基因枪转化法 利用高速运行的金属颗粒轰击细胞时，将包裹在金属颗粒表面的外源DNA分子随金属颗粒进入细胞的转化方法。 此法简单快速，可直接处理植物组织，接触面积大，并有较高的转化率。 (8)脂质体介导转化法 脂质体是由磷脂双分子层组成的人工膜状结构，可将DNA包在其内，并通过脂质体与原生质体的融合或原生质体的吞噬过程，把外源DNA转运到细胞内。 此法的优点是包在脂质体内的DNA可免受细胞内核酸酶的降解、降低对细胞的毒害效应、适应的植物种类广泛、重复性好。 (9)体内注射转化法 利用显微注射仪把外源DNA直接注入受体细胞的转基因方法。 此法操作较为繁琐耗时，但其转化率很高，可用于动植物的外源DNA的转化。 (10)磷酸钙转染法 此法的依据是有的动物细胞能捕获粘附在细胞表面的DNA-磷酸钙沉淀物，使DNA转入细胞。 (11)土壤农杆菌Ti质粒介导的转化法 土壤农杆菌是使受感染植物形成冠瘿瘤的病原因子。土壤农杆菌中含有一种大的Ti质粒，其中具有一组控制植物激素基因。 冠瘿瘤的形成是T-DNA区的植物激素合成基因从转移 并整合到植物细胞基因组的结果。 构建有效的植物转化系统：载体为Ti质粒，宿主为土壤农杆菌，通过土壤农杆菌感染受体植物，将Ti质粒上的目的基因转入植物细胞。 此法简单易行，受体范围广。目前绝大多数双子叶植物转基因技术都是通过该技术完成的。 (12)花粉管通道转化法 基本操作过程：植物授粉过程中，将外源DNA涂在柱头上，使DNA沿花粉管通道或传递组织通过珠心进入胚囊，转化还不具正常细胞壁的卵、合子及早期的胚胎细胞。 此法简单，易于掌握