蛋白质的生物合成分析.ppt

原核细胞内存在三种不同的终止因子（或称释放因子，RF1，RF2，RF3）， RF1能识别UAG和UAA，RF2识别UGA和UAA。 一旦RF与终止密码相结合，它们就能诱导肽基转移酶把一个水分子而不是氨基酸加到延伸中的肽链上。RF3可能与核糖体的解体有关。 真核细胞只有一个（RF）终止因子。它可以识别三类终止密码子，研究发现，在大多数真核生物中，RF都有非常类似的肽链结构。 5.蛋白质合成抑制剂 ??? 蛋白质生物合成的抑制剂主要是一些抗生素，如嘌呤霉素、链霉素、四环素、氯霉素、红霉素等，此外，如5-甲基色氨酸、环已亚胺、白喉毒素、蓖麻蛋白等都能抑制蛋白质的合成。 抗菌素对蛋白质合成的作用： 1）阻止mRNA与核糖体结合（氯霉素）， 2）阻止AA-tRNA与核糖体结合（四环素类）， 3）干扰AA-tRNA与核糖体结合而产生错读（链霉素、新霉素、卡那霉素等）， 4）作为竞争性抑制剂抑制蛋白质合成。 1、链霉素、卡那霉素、新霉素等： 它们主要抑制革兰氏阴性细菌蛋白质合成的三个阶段： ①与30S核糖体结合，抑制起始复合物的形成，使氨基酰tRNA从复合物中脱落； ②在肽链延伸阶段，使氨基酰tRNA与mRNA错配； ③在终止阶段，阻碍终止因子与mRNA结合，使已合成的多肽链无法释放， 而且还抑制70S核糖体的解离。 2、四环素和土霉素： ①作用于细菌内30S小亚基，抑制起始复合物的形成， ②抑制氨基酰tRNA进入核糖体的A位，阻滞肽链的延伸； ③影响终止因子与核糖体的结合，使已合成的多肽链不能脱落离核糖体。四环素类抗生素除对菌体70S核糖体有抑制作用外，对人体细胞的80S核糖体也有抑制作用，但对70S核糖体的敏感性更高，故对细菌蛋白质合成抑制作用更强。 3、氯霉素： 属于广谱抗生素。 ①氯霉素与核糖体上的A位紧密结合，因此阻碍氨基酰tRNA进入A位， ②抑制转肽酶活性，使肽链延伸受到影响，菌体蛋白质不能合成，因此有较强的抑菌作用。 4、白喉霉素（diphtheria toxin） 由白喉杆菌所产生的白喉霉素是真核细胞蛋白质合成抑制剂。它对真核生物的延长因子-2（EF-2）起共价修饰作用，生成EF-2腺苷二磷酸核糖衍生物，从而使EF-2失活，它的催化效率很高，只需微量就能有效地抑制细胞整个蛋白质合成，而导致细胞死亡。 5、嘌呤霉素（Puromycin） 结构与酪氨酰-tRNA相似，从而取代一些氨基酰tRNA进入核糖体的A位，当延长中的肽转入此异常A位时，容易脱落，终止肽链合成。由于嘌呤霉素对原核和真核生物的翻译过程均有干扰干扰作用，故难于用做抗菌药物，有人试用于肿瘤治疗。 嘌呤霉素是通过提前释放肽链来抑制蛋白质合成的。 人天然干扰素分为三种多肽：IFN-α、IFN-β及IFN-γ。IFN-α和IFN-β分别由白细胞和成纤维细胞产生，在酸性环境中稳定。而IFN-γ主要由T淋巴细胞分泌，对酸不稳定。具有广谱的抗病毒、影响细胞生长，以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。 6、干扰素（interferon, IFN） 干扰素的作用机制：干扰素不能直接灭活病毒，而是通过诱导细胞合成抗病毒蛋白（AVP）发挥效应。干扰素首先作用于细胞的干扰素受体，经信号转导等一系列生理过程，激活细胞基因表达多种抗病毒蛋白，实现对病毒的抑制作用。抗病毒蛋白主要包括2′-5′核苷酸合成酶、核酸内切酶和蛋白激酶等。前者降解病毒mRNA、后者抑制病毒多肽链的合成，使病毒复制终止。 四环素,红霉素,氯霉素，链霉素，新霉素，卡那霉素只与原核细胞核糖体发生作用，从而阻遏原核生物蛋白质的合成，抑制细菌生长。 亚胺环己酮，白喉毒素，蓖麻蛋白与真核生物核糖体结合，影响真核生物细胞生长。 嘌呤霉素，干扰素即可抑制原核又可抑制真核生物。 * 第二步，30S小亚基与翻译起始因子IF-3结合，再在SD序列的帮助下与mRNA模板结合 S-D SD序列(shine-Dalgarno序列):---原核生物 1.位于起始密码上游10个核苷酸， 2.序列富含嘌呤(如AGGA /GAGG）的一段序列。 3.能和原核生物16s rRNA相应的富含嘧啶序列 互补。 起始密码 SD序列 Initiation codon 30S亚基具有专一性的识别和选择mRNA起始位点的性质，而IF3能协助该亚基完成这种选择。研究发现，30S亚基通过其16S rRNA的3’末端与mRNA5’端起始密码子上游碱基配对结合。Shine及Dalgarno等证明几乎所有原核生物mRNA上都有一个5’-AGGAGGU-3’序列，这个富含嘌呤区与30S亚基上16S rRNA 3’末端的富含嘧啶区序列5’-GAUCACCUCCUUA-3’相互补。 第三步，