基因工程与育种分析.ppt

课前基础知识背诵 杂交育种的定义 基因工程的定义和工具 限制酶的作用特点 基因工程操作的基本步骤 基因工程育种 2、原理： 3、操作水平： 4、结果： 按照人们的意愿（目的性强）定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。 1、概念： (1)、基因工程的 大肠杆菌(EcoR I)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制酶 C T T A A G A A T T C G （一）基因工程的工具 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 C T T A A G A A T T C G 限制酶 作用特点： 作用结果： 作用部位： 产生黏性末端 磷酸二酯键 (2)、基因工程的 DNA连接酶 其作用与限制酶相反，作用点相同。 C T T A A G A A T T C G DNA连接酶与DNA聚合酶一样吗？为什么？ 【高考警示钟】 容易混淆的DNA连接酶和DNA聚合酶 (1)DNA连接酶：在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键。 (2)DNA聚合酶：可将单个的脱氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸序列上，形成磷酸二酯键。 (3)相同点：这两种酶都是蛋白质，可以形成两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。 3、基因的运载体 （1）条件 ①能在宿主细胞中复制并稳定地保存 ②具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 ③具有标记基因，便于进行筛选 （2）常用的运载体 质粒、噬菌体和动、植物病毒等 主要借鉴细菌或病毒侵染细胞的方法。 1、提取目的基因 ①直接分离基因②人工合成基因 2、目的基因与运载体结合 目的基因与运载体的结合过程，实际上是不同来源的基因重组的过程。 （二）基因工程的步骤 3、目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 检测： 鉴定： 标记基因控制的性状是否出现。 目的基因控制的性状是否出现。 受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。若不能表达，要对目的基因再进行修饰。 （1）常用细菌 繁殖快、代谢快、代谢产物多 （2）转基因动物 （3）转基因植物 有关基因工程的相关提醒 (1)限制酶在第一步和第二步操作中都用到，且要求同一种酶，目的是产生相同的黏性末端；第二步中两种工具酶都用到。 (2)质粒是最常用的运载体，不要把质粒和运载体等同，除此之处，噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。运载体的化学本质为DNA，其基本单位为脱氧核苷酸。 (3)目的基因表达的标志：通过翻译合成相应的蛋白质。 (4)通过基因工程培育的抗虫棉，只能抗虫，不能抗病毒、细菌。 【典例训练1】2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是( ) A．追踪目的基因在细胞内的复制过程 B．追踪目的基因插入到染色体上的位置 C．追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构 【变式】下列有关基因工程的相关叙述中，正确的是 A.基因治疗就是去除生物体细胞中有缺陷的突变基因 B.运载体上抗性基因的存在有利于对目的基因是否表达进行检测 C.在基因工程操作中，必须用同种限制性核酸内切酶剪切目的基因和质粒 D.转基因技术造成的变异，实质上相当于人为的基因重组，但却产生了定向变异 一般用同种限制性核酸内切酶剪切目的基因和质粒，但也有两种不同的限制酶产生相同的黏性末端，如G↓ATTCG 和↓ATTC。 D 基因重组与基因工程间的关系 比较 项目 基因重组 基因工程 不 同 点 重组 基因 同一物种的 不同基因 一般是不同物种间的不同基因 意义 是生物变异的来源之一，对生物进化有重要意义 使人类有可能按自己的意愿直接定向地改造生物的遗传性状，培育出新品种 相同点 都实现了不同基因间的重新组合，都能使生物产生变异 几种遗传育种的方法比较 原理 常用 方式 优点 缺点 举例 杂交 育种 基因 重组 杂交 ↓ 自交 ↓ 选种 ↓ 自交 ①使不同个体优良性状集中在一个个体上; ②操作简便 ①育种时间长; ②局限于亲缘关系较近的个体 矮秆抗病小麦 原理 常用 方式 优点 缺点 举例 诱变 育种 单倍 体育 种 基因 突变 染色 体变 异 辐射、 激光、 空间诱 变等 花药离 体培 养,用 秋水仙 素处理 提高变异频 率,加速育 种进程,大 幅度改良性 状 ①明显缩短 育种年限; ②子代均为 纯合子 有很大盲目性,有利变异少,需大量处理实验材料 青霉