药敏实验方法.doc.docVIP

??药敏实验方法1.实验材料： 1.1培养基：如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦康凯培养基，做沙门氏菌可选择SS培养基，巴氏杆菌可选择血液琼脂。 1.2药敏试纸：购买、自制或厂家提供 1.3细菌：从病鸡病变部位提取，如肝脏、心脏、脾脏等脏器。 1.4接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯 1.5移液器、滴头? 2.实验准备： 2.1药敏片的准备：自制 2.1.1药敏片的制备：取定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片，取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎，经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.2.2抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液适量，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密封，切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。 2.2药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药治疗量3-5倍比例配制药液；如治疗量为1L水加1g药，配制药液时就是1g加200-300ml水或1L水加3-5g药，及配制药敏片所用的药液。? 3.实验操作方法： 3.1药敏片法 3.1.1在“超净台”（或自制无菌操作台）中，用（酒精灯）经火焰灭菌的接种环从病料中挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式：用灭菌接种