Nampt研究内容.docVIP

一、Nampt研究内容Nampt基因转染胰岛β细胞，细胞Nampt基因的表达情况β细胞生长状态NAD情况，及观察对胰岛素分泌的影响隆导入pPACKH1? Lentivector病毒正常，Nampt基因细胞转染，体内回输后检测血浆Nampt蛋白水平观察Nampt造血干细胞在进行分化过程中生存状况是否对寿命影响同时内NamptNAD水平利用血糖情况β细胞增长的影响，血胰岛素。Nampt转基因后，增加表达的Nampt蛋白是否对RBC的生理状况产生改变？对血糖水平的影响如何？对胰岛细胞的影响如何等。 3. 通过构建糖尿病鼠模型人工模拟体内高血糖Nampt基因转染造血干细胞，体内回输后检测血浆Nampt蛋白水平情况；了解转基因后Nampt在造血干细胞中的表达状况分析血浆Nampt蛋白情况观察造血干细胞在是否的，内NamptNAD的水平变化利用血糖情况寿命的粘附情况。β细胞增殖和分泌情况及血胰岛素研究目标血胰岛素Nampt的作用研究奠定基础；弄清楚在氧化应激条件下Nampt对RBC的生存状态和其对糖代谢的影响规律。研究糖尿病氧化应激状态下，从调控Nampt的角度如何恢复RBC的生理功能及作用规律；探讨改善高血糖的状况和对胰岛β细胞生长和分泌影响的规律。 2. 通过G-6-PD模型鼠整体实验,应用造血干细胞的Nampt基因转染研究，观察在是否寿命拟采取的研究方案目的基因引物设计，通过RT-PCR等方法获取DNA，隆导入pPACKH1? Lentivector病毒Nampt基因的调控，应用Western blot、IP和Pull down 等方法研究除目前已知的通过AMPK信号传导途径以外的，能够增强Nampt蛋白的信号传导途径。 5. 分析整理上述结果，综合评价基因在细胞凋亡以及减轻胰岛素抵抗的提出基因调的依据；确定影响胰岛β细胞的因素和改善胰岛素抵抗的机理 1. 通过Nampt基因转染的造血干细胞和DC细胞进行体内回输。在血中高浓度葡萄糖条件下，研究血液Nampt表达水平、RBC内的NAD水平、RBC的代谢状况、生存寿命和利用血糖情况、RBC沉降、粘附和对血管壁的影响；对胰岛β细胞增长繁殖和细胞凋亡的影响，对血清胰岛素分泌水平的影响。 2. 动物的整体实验，对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏状态下的大鼠进行氧化应激处理，检测动物体内RBC的NAD水平、RBC的代谢状况、生存寿命和利用血糖情况、RBC沉降、粘附和对血管壁的影响；尤其是对胰岛β细胞增长繁殖和细胞凋亡的影响进行分析。