细胞破碎分析.pptVIP

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2016-11-22 发布于湖北
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细胞破碎分析.ppt

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3 细胞破碎 3.1 细胞的结构与组成革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌酵母真菌 3.3 细胞破碎技术原理：压挤撞击剪切化学渗透 3.3.1 机械破碎珠磨高压匀浆撞击超声珠磨高压匀浆撞击超声破碎 3.3.2生物化学酶溶常用的酶特点原则注意应用前景 3.3.3 化学渗透酸碱处理有机溶剂表面活性剂金属螯合剂 3.3.4 物理渗透渗透压冲击法冻结融化法干燥法 3.3.5 微波法 300MHZ-400GHZ 电磁波 3.4 包含体溶解与蛋白质的复性重组表达蛋白存在的问题包涵体包涵体形成原因蛋白质复性 * * 细菌细胞壁化学组成肽聚糖糖： N-乙酰葡萄糖胺, N-乙酰胞壁酸, 半乳糖胺氨基酸： D-丙氨酸 L-丙氨酸 D-谷氨酸 L谷氨酸?磷壁质：聚核糖醇磷酸酯聚甘油磷酸酯?糖：葡萄糖，半乳糖，甘露糖脂质: 革兰氏阳性菌细胞壁：磷壁质、胞壁质革兰氏阴性细胞壁：脂多糖，脂蛋白葡萄糖胺与胞壁酸肽聚糖金黄色葡萄球菌胞壁质（AGA N-乙酰葡糖胺；AAM N-乙酰胞壁酸）酵母与真菌成分糖及其氨基衍生物：葡萄糖 30% 甘露糖 30% 半乳糖岩藻糖葡萄糖胺1-2%?氨基酸谷氨酸 5-7% 天门冬氨酸脂质 1-13.5% 酵母细胞壁酵母细胞化学成分 3.2 破碎率的评价破碎率 Y(%)=[(No-N)/No]*100% 直接计数（1）平板计数（2）显微镜计数（3）染色法间接计数（1）活性测定（2）电导率测定压挤剪切化学渗透产物释放珠磨蛋白释放方程释放方程