基因(gene): DNA分子中含有特 定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质最小功能单位。 基因工程(geneome):重组DNA技术是指分离纯化或人工合成的基因(目的基因)与载体在体外进行拼接重组,然后转入宿主细胞(细菌或其他细胞)内,筛选出携带有重组DNA的活宿主细胞,再使之繁殖和扩增,直至表达出目的基因所编码的多肽。由于这一过程类似于一个连续和复杂的工程,所以又称为基因工程。DNA重组体外引入受体细胞(宿主细胞),进行无性繁殖和扩增的过程称为基因克隆技术。 基因工程技术的诞生 基因工程技术的诞生不仅依赖于基因分子生物学理论的发展,同时也有赖于一些重要的分子生物学研究方法的建立。最重要的技术准备是限制性酶的分离纯化、DNA连接酶的分离、大肠杆菌转化技术的突破。到1970年,这三大技术都已经建立,“万事齐备,只欠东风”了。到了1972~1973年,两位科学助产士Berg和Cohen将基因工程接到了人间。 ?第一个重组体的构建 1972年,美国斯坦福大学P.Berg等在PNAS上发表了题为∶“Biochemical methode for inserting new genetic information into DNA of Simian Virus 40:circular SV40 DNA molecules cotaining lamda
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