选修基因工程的技术方案.ppt

选修三 现代生物科技专题 第一章：基因工程 第二章：细胞工程 第三章：胚胎工程 第四章：生态工程 基因工程 科技探索之路： 1.1 DNA重组技术的基本工具 1.2 基因工程的基本操作程序 1.3 基因工程的应用 1.4 蛋白质工程的崛起 基因决定性状（一） 青霉菌能产生对人类有用的抗生素——青霉素 基因决定性状（二） 家蚕能够吐出蚕丝为人类利用 基因决定性状（三） 豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮 定向基因改造设想 基因工程的基本操作程序 （1）目的基因的获取 （2） （3）将目的基因导入受体细胞 （4）目的基因的检测与鉴定 一、教学目标 1.描述基因操作程序的四个步骤 2.尝试设计某一转基因工程的研究过程 二、 教学重点和难点 1. 教学重点 提取目的基因的方法 目的基因导入受体细胞的途径。 基因工程基本操作程序的四个步骤。 2. 教学难点 从基因文库中获取目的基因。 利用PCR技术扩增目的基因。 探讨问题 1、获取目的基因的方法有哪些？ 2、重组质粒必须具备哪些的条件？ 3、将基因表达载体导入受体细胞的方法有哪些？ 4、如何从不同水平上检测和鉴定目的基因成功导入和表达？ 一、目的基因的获取 1、目的基因： 主要指的是编码蛋白质的结构基因，也可以是一些具有调控作用的因子。 2、获取方法： （1）从基因文库中获取目的基因； （2）利用PCR技术扩增目的基因； （3）通过DNA合成仪用化学方法直接合成 （一）从基因文库中获取目的基因 1.什么叫基因文库？ 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，每个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 课堂练习 1、因工程的操作步骤：① 使目的基因与运载体相结合，② 将目的基因导入受体细胞，③ 检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，④ 提取目的基因，正确的操作顺序是（ ） A. ③②④① B. ②④①③ C. ④①②③ D. ③④①② 2. 工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（ ） A. 人工合成基因 B. 目的基因与运载体结合 C. 将目的基因导入受体细胞 D. 目的基因的检测和表达 3. 科学家通过基因工程培育抗虫棉时，需要从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因，“放入”棉花的细胞中与棉花的DNA结合起来并发挥作用，请回答下列有关问题： （1）从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是_______，此工具主要存在于_________中，其特点是______ 。 （2）苏云金芽孢秆菌一个DNA分子上有许多基因，获得抗虫基因常采用的方法是从基因文库中获取。具体做法是：用_____酶将苏云金芽孢杆菌的_____切成许多片段，然后将这些片段____，再通过______转入不同的受体细胞，让它们在各个受体细胞中大量_______，从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把_________分离出来。 （3）进行基因操作一般要经过的四个步骤是 ____________。 作业题 包括抗虫、抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度； 基因工程产品与天然产品的活性比较，以确定功能是否相同等。 个体水平鉴定 是否成功显示出杂交带 抗原—抗体杂交 目的基因是否翻译出蛋白质 第三步 是否成功显示出杂交带 分子杂交技术 （DNA和mRNA之间） 目的基因是否转录出mRNA 第二步 是否成功显示出杂交带 DNA分子杂交 （DNA和DNA之间） 目的基因是否进入受体细胞 第一步 分子检测 结果显示 方法 检测内容 步骤 类型 目的基因的表达和检测 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 转化法（微生物）、农杆菌转化法（植物）、显微注射法（动物） 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 C C （1）限制性内切酶 微生物 一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列， 并在特定的点位切